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膜蛋白和胞浆蛋白提取试剂盒

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  • 2025年07月10日
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    • 保质期

      一年

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      大量

    • 供应商

      贝博生物

    • 规格

      50T/100 T

    规格:50T产品价格:¥800.0
    规格:100 T产品价格:¥1500.0
    产品概述 product description

    动物跨膜蛋白承担各种生物功能,在疾病的发生、发展过程中扮演重要角色。膜蛋白样品的制备需要充 分考虑到与下游的胶分析及质谱分析等应用配套,因此膜蛋白样本制备成为一个难以逾越的挑战。 贝博® BBproExtra® 膜蛋白和胞浆蛋白提取试剂盒是一种高效的高产膜蛋白提取试剂盒。本试剂盒提供全套试剂,适用于从细胞和动物组织提取膜蛋白和胞浆蛋白。提取过程简单方便。 本试剂盒提取的蛋白可用于Western Blotting、蛋白质电泳、免疫沉淀、ELISA、转录活性分析、Gel shift凝胶阻滞实验、酶活性测定等下游蛋白研究实验。 本试剂盒提取的蛋白为具有天然蛋白构象的活性蛋白。 本试剂盒中不含有EDTA,与金属螯和层析等下游应用兼容。

    有效期
    一年
    检测方法
    WB,IP等
    适用样本
    动物细胞/组织
    产品特点
    1.使用方便,从细胞,组织中提取蛋白不需经过研磨、反复冻融、超声破碎等前处理。
    2.提取过程简单方便。
    3.含蛋白稳定剂,提取的蛋白稳定。
    4.紫外检测蛋白浓度时,背景干扰低。
    5.蛋白提取液含多种有效成分,可以充分释放胞浆蛋白和膜蛋白,又可结合释出的蛋白防止沉淀。
    6.蛋白酶抑制剂抑制了蛋白的降解,蛋白酶抑制剂配方优化。蛋白酶抑制剂混合物包含6种独立的蛋白酶抑制剂AEBSF、Aprotinin、Leupeptin、Pepstatin A、Bestatin、E-64,每一种抑制剂可特异性抑制某一种或几种蛋白酶活性。该混合物优化的组成使其可以抑制几乎所有重要的蛋白酶活性,包括丝氨酸蛋白酶、半胱氨酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶、丙氨酰-氨基肽酶等。
    产品应用
    WB,IP等
    仪器准备
    1.离心机
    2.振荡器
    3.匀浆机/匀浆器
    4.涡旋混匀器
    5.移液器
    6.冰箱
    7.冰盒
    试剂准备
    1.PBS缓冲液
    2.蛋白定量试剂盒
    耗材准备
    1.离心管
    2.吸头
    3.一次性手套
     
    使用方法
    A. 细胞蛋白提取
    1. 提取液准备:
    每500 μl冷的蛋白提取液A中加入2 μl蛋白酶抑制剂混合物,2 μl蛋白稳定剂,混匀后置冰上备用。
    每500 μl膜蛋白溶解液C中加入2 μl蛋白酶抑制剂混合物,混匀后置冰上备用。
    2. 取5-10×106个以上细胞,在4℃,500×g条件下离心2-3分钟,小心吸取培养基,尽可能吸干,收集细胞。
    3. 用冷PBS洗涤细胞两次,每次洗涤后尽可能吸干上清。
    4. 细胞样品中加入200 μl冷的试剂 A,高速涡旋振荡5秒,置2-8℃振荡30分钟-1小时。
    5. 再次高速涡旋振荡5秒,然后在4℃,13000×g条件下离心5分钟。
    6. 将上清吸入另一预冷的干净离心管,37℃水浴10分钟,37℃条件 2000g离心3分钟,此时溶液分为两层,下层约为20-50 μl。
    7. 小心收集上层,即为胞浆蛋白。下层为膜蛋白。
    8. 用150-200 μl冰冷的试剂B稀释下层膜蛋白部分,混匀后冰浴2分钟,然后37℃水浴5-10分钟,37℃条件 500-2000g离心3分钟,此时溶液分为两层,下层约为20-50 μl。
    9. 小心移除上层,用50-200 μl冰冷的试剂C溶解下层,即得膜蛋白。
    10. 将上述蛋白提取物定量后分装于-80℃冰箱保存备用或直接用于下游实验。

    B. 组织蛋白提取
    1. 取适量组织样本用手术剪刀尽可能剪碎,加入冷的蛋白提取液A,用组织匀浆机/匀浆器匀浆至无明显肉眼可见固体,将匀浆吸入另一预冷的干净离心管。
    2. 按照细胞蛋白的提取方法的第3步骤往下操作即可。

     

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    • 作者
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    该产品被引用文献
    参考文献
    1.RuhanJiang, et al.
    A study on the degradation efficiency of fluoranthene and the transmembrane protein mechanism of Rhodococcus sp. BAP-1 based on iTRAQ
    Science of The Total Environment 2020 (IF=6.551)

    2.YubinFeng, et al.
    ATPR-induced differentiation and G0/G1 phase arrest in acute promyelocytic leukemia by repressing EBP50/NCF1 complex to promote the production of ROS
    Toxicology and Applied Pharmacology 2019 (IF=3.585)

    3.Cuilian Yu, et al.
    Taishan Pinus massoniana pollen polysaccharide inhibits subgroup J avian leucosis virus infection by directly blocking virus infection and improving immunity
    Sci Rep. 2017 (IF=5.228)

    4.Xiaoyun Lin, et al.
    Chimerically fused antigen rich of overlapped epitopes from latent membrane protein 2 (LMP2) of Epstein–Barr virus as a potential vaccine and diagnostic agent
    Cellular & Molecular Immunology 2016 (IF=8.213)

    5.Ge Zhao, et al.
    Phage Display against Corneal Epithelial Cells Produced Bioactive Peptides That Inhibit A spergillus Adhesion to the Corneas
    PLoS ONE March 2012 | Volume 7 | Issue 3, (IF=4.411)


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