植物组蛋白提取试剂盒

贝博® BBproExtra® 植物组蛋白提取试剂盒提供了一种简单而应用广泛的方法以及相应的试剂提取组蛋白。适用于从各种植物细胞、组织样本中提取组蛋白。提取过程简单方便。组蛋白提取产物的产量大约0.2-0.4 mg 每107 个细胞或100 mg 组织，不同的细胞和组织中，产量差异很大。 提取的蛋白可用于Western Blotting、蛋白质电泳、组蛋白修饰实验比如乙酰化、甲基化、sumoylation等下游蛋白研究。 贝博® BBproExtra® 可以提供针对动物细胞、组织、植物、真菌、酵母、微生物、藻类、液体、土壤等各种不同样本的蛋白提取试剂盒。

 

植物组织组蛋白提取：
1. 提取液制备：
每500 μl蛋白提取液A中加入2 μl蛋白酶抑制剂混合物混匀后置冰上备用。
2. 取100 mg植物组织样本用剪刀尽可能剪碎，加入蛋白提取液A，用组织匀浆器匀浆至无明显肉眼可见固体。
3. 将组织匀浆吸入一预冷的干净离心管中，静置10分钟，在4℃，16000g条件下离心15分钟，弃上清。
4. 沉淀中加入100 μl组蛋白提取液B。
5. 用200 μl枪头反复吹打混匀或充分涡旋振荡混匀，置4℃冰箱过夜存放。
6. 16000g条件下离心10分钟，收集上清。
7. 在上清中加入10-20 μl 试剂C充分混匀。
8. 加入上样缓冲液混匀后煮沸，分装于-80℃冰箱保存备用或直接用于下游实验。

植物细胞组蛋白提取：
1. 提取液制备：每500 μl蛋白提取液A中加入2 μl蛋白酶抑制剂混合物混匀后置冰上备用。
2. 收集5-10×106个细胞，在4℃，1000g条件下离心5-10分钟，吸干上清，收集细胞。
3. 用冷PBS洗涤细胞两次，每次洗涤后尽可能吸干上清。
4. 每5-10×106个细胞中加入500 μl蛋白提取液A，混匀后，在4℃条件下轻轻振荡15分钟。
5. 在4℃，16000g条件下离心15分钟，弃上清。
6. 沉淀中加入100 μl组蛋白提取液B。
7. 用200 μl枪头反复吹打混匀或充分涡旋振荡混匀。
8. 置4℃冰箱过夜存放。
9. 16000g条件下离心10分钟，收集上清。
10. 在上清中加入10-20 μl 试剂C充分混匀。
11. 加入上样缓冲液混匀后煮沸，分装于-80℃冰箱保存备用或直接用于下游实验。