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文献和实验真香!用 qPCR 做外泌体研究,南京医科大学拿下 41 分 SCI
。 2)RNA 提取 外泌体 RNA 可以用专用的外泌体 RNA 提取试剂盒提取,也可以用 Trizol 法提取,建议 Trizol 与外泌体的体积比不小于 4:1(也可以用 Trizol 直接裂解外泌体沉淀)。 具体操作:取 200 μl 外泌体于 1.5 ml EP 管中,加入 800 μl Trizol 试剂,充分混合,裂解 10 min,12000 rpm 离心 10 min 取上清。 3)反转录 采用 Umibio 4× 预混型快速逆转录试剂盒:适用于长片段 RNA(如 mRNA、LncRNA
分析实验。 解决方案 1. 血液越新鲜越好,在血液收集管中使用 RNA 稳定试剂来保存 RNA。 2. 血液 RNA 提取本质上是白细胞 RNA 提取,使用 Ficoll-Hypaque 密度梯度离心法回收单核细胞。 3. 去除抗凝剂和酶抑制剂。 4. 可采用专门用于血液样本的 RNA 提取试剂盒(如:QIAamp RNA Blood Mini Kit,货号:52304),其中含有高效的红细胞裂解液,在有效裂解细胞的同时也能防止其中释放出的大量 RNase 对后续 RNA 提取的影响。
RNAsimple 总 RNA 提取试剂盒操作指南(DP419) ——植物
以下操作按照天根产品 DP419 RNAsimple 总 RNA 提取试剂盒的说明书进行,所有反应现象仅适用于该产品及本文所标明的样本量。如使用其它操作流程或产品,样本量不同可能现象与本文有所差异。实验准备:1. 植物叶片 研钵 液氮2. 无水乙醇 氯仿3. 移液器及配套 RNase-free 无菌枪头(200 μl ,1ml),1.5 ml,2.0ml 离心管(RNase-free)4. 涡旋振荡器,台式低温离心机实验准备-试剂盒准备:第一次使用前应在去蛋白液 RD、漂洗液 RW 中
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