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- 2025年07月11日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
2-8℃
- 保质期：
一年
- 库存：
大量
- 供应商：
贝博生物
- 规格：
50T/100 T
| 规格： | 50T | 产品价格： | ￥650.0 |
|---|---|---|---|
| 规格： | 100 T | 产品价格： | ￥950.0 |
贝博® BBcellProbe® 线粒体膜电位检测试剂盒（RHO123）是利用Rhodamine 123探针检测线粒体膜电位变化的试剂盒，可以快速灵敏地检测细胞、组织或纯化的线粒体膜电位变化，可以用于早期的细胞凋亡检测。 粒体膜电位的下降是细胞凋亡早期的一个标志性事件。Rho123是一种可以通透细胞膜的选择性染色活细胞线粒体的荧光染料，广泛用作检测线粒体膜电位(mitochondrial membrane potential)的荧光探针。Rho123是阳离子荧光染料，在正常细胞中能够依赖线粒体跨膜电位进入线粒体基质。在细胞凋亡发生时，线粒体膜完整性破坏，线粒体膜通透性转运孔开放，引起线粒体跨膜电位(ΔΨm) 的崩溃，Rho123 重新释放出线粒体。通过荧光信号的强弱来检测线粒体膜电位的变化，可用于培养的细胞或从组织中提取出的线粒体的膜电位检测。 贝博® BBcellProbe® Rho123可以快速通过细胞膜，仅需几分钟就可以被具有活性的线粒体所俘获，并且对细胞没有任何毒性。Rho123的最大激发波长为507 nm，最大发射波长为529 nm。在荧光显微镜下观察，呈现黄绿色荧光。
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文献和实验悬浮细胞
1. 试剂配制：
1X染色缓冲液配制：
根据样品数按下列比例配制1X染色缓冲液，取100 μl 10×染色缓冲液加900 μl纯水稀释，混匀并预热至37℃，即成1×染色缓冲液；
Rho123染色工作液的配制：
根据样品数按下列比例配制Rho123染色工作液。在500 μl 1×缓冲液中加入4 μl Rho123，混匀配成Rho123染色工作液。
2. 收集样本细胞以及阴性、阳性对照细胞。
3. 用PBS洗涤细胞两次。离心收集细胞。
4. 用500 μl Rho123染色工作液将细胞重悬，细胞密度约5-10X105个/ml。37℃，5% CO2的培养箱中孵育15分钟。
5. 常温离心收集细胞。 用PBS洗涤细胞1次。
6. 用500 μl预热的1X染色缓冲液将细胞重悬。
7. 用流式细胞仪或荧光酶标仪/分光光度计检测分析结果，或者用荧光显微镜或激光共聚焦显微镜观察结果。
贴壁细胞
对于贴壁细胞，可以先收集细胞，重悬后参考悬浮细胞的检测方法。
纯化线粒体
1． 把配制好的RHO123 染色工作液再用RHO123孵育缓冲液(1×)稀释5 倍。
2． 0.5 mL 5倍稀释的RHO123 染色工作液中加入0.1 mL 总蛋白量为10～100ug的纯化的线粒体。
3． 结果检测。
组织样本
组织样本可以用玻璃匀浆器匀浆成单细胞悬液后按照细胞样本的方法检测。也可以用其他细胞悬液制备的试剂盒处理组织后检测。
结果分析 ：
检测时可以把激发光设置为490 nm，发射光设置为530 nm。
线粒体膜电位降低，荧光强度减弱。
用流式细胞仪检测细胞线粒体膜电位的情况。
也可以用荧光显微镜或激光共聚焦显微镜观察；用荧光分光光度计或荧光酶标仪检测。
【求助】Rhodamine 123 荧光强度和线粒体膜势能问题，求解！
看得比较多的观点是正常的强，凋亡的弱 zhuqueleee Rhodamine 123也称2-(6-Amino-3-imino-3H-xanthen-9-yl)benzoic acid methyl ester，分子式为C21H17ClN2O3，分子量为380.82。 Rhodamine 123是一种可以通透细胞膜的选择性染色活细胞线粒体的荧光染料，广泛用作检测线粒体膜电位(mitochondrial membrane potential)的荧
线粒体跨膜电位DYmt的下降，被认为是细胞凋亡级联反应过程中最早发生的事件，它发生在细胞核凋亡特征（染色质浓缩、DNA断裂）出现之前，一旦线粒体DYmt崩溃，则细胞凋亡不可逆转。 线粒体跨膜电位的存在，使一些亲脂性阳离子荧光染料如Rhodamine 123、3，3-Dihexyloxacarbocyanine iodide[DiOC6（3）]、Tetrechloro-tetraethylbenzimidazol carbocyanine iodide[JC-1]、Tetramethyl
线粒体膜势能的检测 线粒体在细胞凋亡的过程中起着枢纽作用,多种细胞凋亡刺激因子均可诱导不同的细胞发生凋亡,而线粒体跨膜电位DYmt的下降,被认为是细胞凋亡级联反应过程中最早发生的事件,它发生在细胞核凋亡特征(染色质浓缩、DNA断裂)出现之前,一旦线粒体DYmt崩溃,则细胞凋亡不可逆转. 线粒体跨膜电位的存在,使一些亲脂性阳离子荧光染料如Rhodamine 123、3,3-Dihexyloxacarbocyanine iodide[DiOC6(3)]、Tetrechloro
