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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
干燥密封保存
- 供应商:
赫澎(上海)生物
- 规格:
20次
产品内容
HEPENGBIO清理液(Reagent A) 毫升
HEPENGBIO裂解液(Reagent B) 毫升
HEPENGBIO缓冲液(Reagent C) 毫升
HEPENGBIO反应液(Reagent D) 毫升
HEPENGBIO底物液A(Reagent E) 毫升
HEPENGBIO底物液B(Reagent F) 毫升
HEPENGBIO补充液(Reagent G) 毫升
HEPENGBIO标准液(Reagent H) 毫升
产品说明书 1份
保存方式
保存在4℃冰箱里;HEPENGBIO底物液B(Reagent F),避免光照,
用户自备
15毫升锥形离心管:用于样品操作的容器
1.5毫升离心管:用于样品操作的容器
2.2毫升离心管:用于配制标准样品的容器
DOUNCE匀浆器:用于裂解组织
尼龙网(nylon mesh):用于去除残渣
4℃(微型)台式离心机:用于样品处理
沸水装置:用于反应物孵育
比色皿:用于比色测定的容器
分光光度仪:用于比色分析
实验步骤
一、样品准备
- 准备好新鲜的植物组织(叶片、谷粒、种子等),并秤重以确定1克组织重量
- (选择步骤)放进预冷的15毫升锥形离心管
- (选择步骤)加入xx毫升HEPENGBIO清理液(Reagent A)清洗1次
- 移入到一个液氮冻存管
- 即刻放进液氮罐过夜
- 次日从液氮罐里取出,即刻(快速度)碾碎组织成粉末(注意:切莫使组织冻融)
- 放进一个15毫升锥形离心管
- 加入预冷的xx毫升HEPENGBIO裂解液(Reagent B)
- 涡旋震荡5秒,充分混匀
- 即刻放进预冷的DOUNCE匀浆器
- 置于冰槽里用研磨棒匀化组织(约80下)
- 准备1个小型漏斗,内衬尼龙丝或150微米的尼龙网(nylon mesh),置于15毫升锥形离心管上
- 将所有组织匀浆物移入到小型漏斗里过滤
- (选择步骤)或者放进4℃台式离心机离心10分钟,速度为1000g
- 小心移取无渣液分装到预冷的1.5毫升离心管
- 移取10微升进行蛋白定量检测(注意:建议使用HEPENGBIO Bradford蛋白质浓度定量试剂盒-HEPENGBIO30030.1)
- 即刻放进-70℃保存或置于冰槽里继续后续操作(注意:后续操作须在2小时内完成)
二、测定准备
- 从-70℃取出待测样品(例如植物组织裂解悬液样品等),置于冰槽里
- 设定好分光光度仪(温度为25℃):波长为540nm,并置零
- HEPENGBIO缓冲液(Reagent C)室温下均衡温度
- 测定开始前,移出xx微升HEPENGBIO底物液B(Reagent F)到新的1.5毫升离心管,加入xx微升HEPENGBIO底物液A(Reagent E),混匀后,置于冰槽里,标记为HEPENGBIO底物工作液(2次操作),放在暗室里备用。然后进行下列操作
-
- 标准样品测定
- 准备好5个2.2毫升离心管,标记为1至5号管
- 分别加入xx毫升HEPENGBIO缓冲液(Reagent C)到1至5号管
- 移取xx毫升HEPENGBIO标准液(Reagent H)到1号管,混匀
- 小心移取xx毫升1号管稀释的HEPENGBIO标准液(Reagent H)到2号管,混匀
- 小心移取<
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文献和实验能将淀粉水解成麦芽糖,由于麦芽糖能将3,5-二硝基水杨酸试剂还原成3-氨基-5-硝基水杨酸的橙红色化合物,且在一定范围内还原糖的浓度与反应液的颜色成正比,故利用比色法可求出麦芽糖的含量。以5分钟内每克样品水解产生麦芽糖的毫克数表示酶活性的大小。 植物淀粉酶可分为α-淀粉酶和β-淀粉酶两种,其中β-淀粉酶不耐热,在温度70℃以上易钝化:而α-淀粉酶不耐酸,在pH3.6以下则发生钝化。根据以上特性,可分别测定这两种淀粉酶的活性。如测定α-淀粉酶和β-淀粉酶的活性,即为淀粉酶总活性
作者:吴学飞,张有江,江蓉 作者单位:(扬州市疾病预防控制中心,江苏 扬州 225002) 【摘要】 目的:运用生化分析仪测定血清淀粉酶,并对血清淀粉酶在糖尿病监测中的应用进行探讨。方法:运用对硝基苯麦芽七苷糖法(PNP-G7) 测定血清淀粉酶。结果:通过对糖尿病人,健康人群,血糖控制正常的糖尿病患者测定血清淀粉酶,糖尿病组的均值明显低于其他两组。结论:上述三组人群中,糖尿病组与后两组有显著差异,但后两组之间无显著
,具有鲜明的环保特色。 淀粉酶的分类 amylase,AMY,AMS一般作用于可溶性淀粉、直链淀粉、糖元等α-1,4-葡聚糖,水解α-1,4-糖苷键的酶。根据酶水解产物异构类型的不同可分为α-淀粉酶(EC3.2.1.1.)与β-淀粉酶(EC3.2.1.2.)。 α-淀粉酶广泛分布 于动物(唾液、胰脏等)、植物(麦芽、山萮菜)及微生物。微生物的酶几乎都是分泌性的。此酶以Ca2+为必需因子并作为稳定因子和激活因子,也有部分淀粉酶为非Ca2+依赖型。淀粉酶
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