- ￥4840
- 赫澎生物
- 上海
- HPBIO-JM8168
- 2025年11月07日
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干燥密封保存
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赫澎（上海）生物
- 规格：
20次
果胶甲酯酶（pectin methylesterase；PME；EC3.1.1.11），又称为果胶酯酶（pectinesterase），是一种细胞壁相关的果胶水解（pectolytic）酶蛋白，分子量为34－37kDa，存在于所有植物组织中，以及植物病源菌（真菌和细菌）里。果胶（pectin）是细胞壁的主要结构元素，占35％的多糖。果胶是同型聚糖半乳糖醛酸（homogalacturonan；HGA）和鼠李聚糖半乳糖醛酸（rhmnogalacturonan；RG）的复合物。其中80％的同型聚糖半乳糖醛酸为甲基酯化。果胶甲酯酶通过使果胶去酯化（deesterification），产生水溶性的果胶酸（pectic acid）和甲醇。植物果胶甲酯酶分成2型：I型和II型。其功能在于参与植物发育、形态形成、成熟、细胞壁延展和稳固、水果软化脱落和衰老、防止感染等，以及细菌和真菌果胶降解等。果胶甲酯酶常用于果菜汁等的澄清、液化、和水果软化和成熟。基于底物果胶，在果胶甲酯酶的催化下，产生果胶酸和甲醇，进而在酒精氧化酶（alcohol oxidase）的作用下，产生并收集甲醛（aldehyde），同时使用N-甲基苯噻唑啉酮-2-腙（N-methylbenzothiazolinone-2-hydrazone；MBTH），在中性条件下，进行浓缩反应，后酸化处理，在三价铁氧化剂的参与下，形成蓝色甲簪产物，在分光光度仪下（620nm波长），来定量分析果胶甲酯酶的总活性。果胶甲酯酶酶偶联反应系统为：
产品内容
HEPENGBIO裂解液（Reagent A） 毫升
HEPENGBIO保存液（Reagent B） 毫升
HEPENGBIO缓冲液（Reagent C） 毫升
HEPENGBIO反应液（Reagent D） 微升
HEPENGBIO底物液（Reagent E） 微升
HEPENGBIO阴性液（Reagent F） 毫升
HEPENGBIO显色液（Reagent G） 毫升
产品说明书 1份
保存方式
保存HEPENGBIO反应液（Reagent D）和HEPENGBIO底物液（Reagent E）在－20℃冰箱里，避免反复冻融；其余的保存在4℃冰箱里；HEPENGBIO显色液（Reagent G）避免光照，
用户自备
15毫升离心管：用于样品处理的容器
1.5毫升离心管：用于样品处理和保存的容器
（微型）台式离心机：用于样品收集
DOUNCE匀浆器：用于裂解组织
培养箱：用于孵育反应物
比色皿：用于比色的容器
分光光度仪：用于比色分析
实验步骤
实验开始前，将－20℃冰箱里的试剂盒中的试剂溶液放进冰槽里融化。然后进行下列操作。
二、测定准备
产品内容
HEPENGBIO裂解液（Reagent A） 毫升
HEPENGBIO保存液（Reagent B） 毫升
HEPENGBIO缓冲液（Reagent C） 毫升
HEPENGBIO反应液（Reagent D） 微升
HEPENGBIO底物液（Reagent E） 微升
HEPENGBIO阴性液（Reagent F） 毫升
HEPENGBIO显色液（Reagent G） 毫升
产品说明书 1份
保存方式
保存HEPENGBIO反应液（Reagent D）和HEPENGBIO底物液（Reagent E）在－20℃冰箱里，避免反复冻融；其余的保存在4℃冰箱里；HEPENGBIO显色液（Reagent G）避免光照，
用户自备
15毫升离心管：用于样品处理的容器
1.5毫升离心管：用于样品处理和保存的容器
（微型）台式离心机：用于样品收集
DOUNCE匀浆器：用于裂解组织
培养箱：用于孵育反应物
比色皿：用于比色的容器
分光光度仪：用于比色分析
实验步骤
实验开始前，将－20℃冰箱里的试剂盒中的试剂溶液放进冰槽里融化。然后进行下列操作。
- 样品准备
- 准备好新鲜植物组织，并秤重以确定组织重量200毫克
- 移入到一个液氮冻存管
- 即刻放进液氮罐过夜
- 次日从液氮罐里取出，即刻（快速度）用研磨棒碾碎组织成粉末状（注意：切莫使组织冻融）
- 放进一个15毫升锥形离心管
- 加入预冷的xx微升HEPENGBIO裂解液（Reagent A）
- 涡旋震荡5秒，充分混匀
- 即刻放入预冷的DOUNCE匀浆器
- 在冰槽里用研磨棒匀化组织（约80下）
- 将所有组织匀浆物移入1.5毫升离心管
- 放进4℃微型台式离心机离心5分钟，速度为16000g（或13000RPM，例如eppendorf 5415）
- 小心抽去上清液
- 加入预冷的xx微升HEPENGBIO保存液（Reagent B），混匀
- 移取10微升进行蛋白定量检测（注意：建议使用HEPENGBIO Bradford蛋白质浓度定量试剂盒－）
- 即刻放进－70℃保存或置于冰槽里继续后续操作
二、测定准备
- 准备好待测样品（例如植物组织裂解萃取液等），置于冰槽里（注意：样品须澄清）
- 设定好分光光度仪（温度为30℃）：波长为620nm，并置零
- 背景测定
- 移取xx微升HEPENGBIO缓冲液（Reagent C）到新的比色皿
- 加入xx微升HEPENGBIO反应液（Reagent D）
- 加入xx微升HEPENGBIO底物液（Reagent E）
- 加入xx微升HEPENGBIO阴性液（Reagent F）
- 在30℃温度下孵育60分钟
- 加入xx微升HEPENGBIO显色液（Reagent G），混匀
- 室温下静置30分钟，避免光照
- 加入xx微升HEPENGBIO阴性液（Reagent F），混匀
- 即刻放进分光光度仪检测：获得背景吸光读数
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文献和实验相关实验
pectin pectylhydrase之常用名，亦称为果胶酶、果胶甲酯酶、果胶氧化酶。为催化果胶的甲氧酯水解产生果胶酸和甲醇反应的酶。 EC3· 1· 1· 11。除广泛分布于高等植物外，已知在霉菌、细菌中也存在。对脱酯反应的底物特异性尚不十分清楚。因此酶在高等植物中几乎仅作用于甲酯，所以有对此酶应使用果胶甲酯酶这一名称的意见。活性测定是以果胶为底物，对在一定条件下产生的羧基用碱定量；另也有通过对所产生的甲醇进行定量的方法。最适 pH为 8— 4，视酶源而异。一些阳离子特别是 Na
系果胶酸的组成单位，果胶的主要成分。存在于植物的粘液、树胶和细菌多糖中，多数为甲酯。 D-半乳糖醛酸具有 1分子的结晶水。比旋 脱水而成。靠地衣酚反应或间萘二酚反应可以检出，遇亚硫酸复红呈红紫色。
原果胶酶 protopectinase 使原果胶水解形成水溶性果胶或果胶酯酸的酶。见于高等植物的果实、根、叶以及霉菌和细菌中，认为植物组织的分解、软化与此有关。然而对原果胶具有特异酶的存在井来得到证实，可认为是由于多聚半乳糖酶（polygalacturonase）和果胶反式消去酶（pectin transeliminase）的作用。
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植物果胶甲酯酶（pectin methylesterase；PME）活性比色法定量检测试剂盒
￥4840
