GST融合蛋白同位素（[γ32P]ATP）激酶标记试剂盒

谷胱甘肽-S-转移酶（glutathione-S-transferase；GST）融合蛋白（fusion protein）的，广泛应用于蛋白与蛋白之间相互作用的研究、抗体的和纯化、以及生化分析。基于GST融合蛋白由GSTmoietry、蛋白酶切离部位和已知激酶磷酸化部位构成，使用同位素（[γ³²P]ATP）和cAMP依赖性蛋白激酶A（protein kinase K），标记纯化的目标融合蛋白，作为敏感的探针，在远西方杂交（FAR WESTERN BLOT） 印迹实验或印迹覆膜结合（BLOT OVERLAY BINDING）实验中，探测和分析结合蛋白或多肽结构域。GST融合蛋白同位素（[γ³²P]ATP）激酶标记是蛋白组学研究的常用工具。

产品内容

HEPENGBIO缓冲液（Reagent A） 毫升
HEPENGBIO标记液（Reagent B） 微升（用户自备）
HEPENGBIO反应液（Reagent C） 微升
HEPENGBIO酶促液（Reagent D） 微升
产品说明书 1份

保存方式

保存在－20℃冰箱里；

用户自备

[γ³²P]ATP 同位素：用于同位素标记
1.5毫升离心管：用于样品反应操作和保存的容器
干式恒温仪：用于标记孵育
液体闪烁计数器（liquid scintillation counter）：用于同位素活性测定

实验步骤

1. 准备好纯化的GST融合蛋白
2. 移取xx微升HEPENGBIO缓冲液（Reagent A）到1.5毫升离心管
3. 加入2.5微升用户自备的GST融合蛋白（总量为10微克）
4. 加入xx微升HEPENGBIO标记液（Reagent B）（注意：同位素总量为10毫居里/毫升；5000居里/毫摩尔）
5. 加入xx微升HEPENGBIO反应液（Reagent C）
6. 加入xx微升HEPENGBIO酶促液（Reagent D）
7. 枪头上下抽吸混匀
8. 放进30℃干式恒温仪孵育30分钟
9. 放进-70℃保存或置于冰槽里备用
10. 或使用5至10微升（10⁷CPM）标记蛋白继续后续远西方杂交（FAR WESTERN BLOT） 印迹实验和印迹覆膜结合（BLOT OVERLAY BINDING）实验等