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特殊石蜡切片磷脂尼罗红(Nile Red)间接荧光染色试剂盒

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  • ¥5500
  • 赫澎生物
  • 上海
  • HPBIO-JM4770
  • 2025年11月11日
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    • 供应商

      赫澎(上海)生物

    • 规格

      10次

     脂类物质(LIPIDS)是一类脂溶性(疏水性)的自然分子,分为简单脂质包括脂肪酸(FATTY ACID)及其衍生物甘油一脂、二脂、三脂;复合脂质包括磷脂、糖脂、硫脂以及脂蛋白;和中性脂质包括甘油、固醇类(STEROL)物质,例如胆固醇。脂类物质在机体中具有能量储存的作用,是膜结构的组成成分和细胞信号分子。尼罗红染色剂(9-diethylamino-5H-benzo[alpha]-phenoxazine-5-one;Nile red)是一种亲脂性的恶嗪类荧光染料。与极性脂类物质,例如磷脂结合后,在特定激发波长543nm的激发下,显示强烈桔红色荧光(散发波长598nm)。其分子式为C20H18N2O2,分子量为318。由于组织切片在包埋前处理和染色前脱蜡的过程中,有机溶剂容易破坏和减少组织中的脂质成分,因此防护和固定组织中的脂质成分是尼罗红染色的关键。

    产品内容

    HEPENGBIO清理液(Reagent A) 毫升
    HEPENGBIO固着液(Reagent B) 毫升
    HEPENGBIO乳化液(Reagent C) 毫升
    HEPENGBIO净化液(Reagent D 毫升
    HEPENGBIO氧化液(Reagent E) 毫升
    HEPENGBIO修复液(Reagent F) 毫升
    HEPENGBIO脱蜡液(Reagent G) 毫升
    HEPENGBIO补水液A(Reagent H 毫升
    HEPENGBIO补水液B(Reagent I 毫升
    HEPENGBIO补水液C(Reagent J 毫升
    HEPENGBIO补水液D(Reagent K 毫升
    HEPENGBIO染色液(Reagent L) 微升
    HEPENGBIO稀释液(Reagent M) 毫升
    产品说明书 1份

    保存方式

    保存HEPENGBIO染色液(Reagent L)在-20℃冰箱里,避免光照;其余的保存在4℃冰箱里;有效保证6

    用户自备

    无离子水:用于清洗样品
    1.5毫升离心管:用于反应液配制和样品操作的容器
    无菌手术刀和镊子:用于组织块处理
    恒温培养箱:用于组织处理孵育
    6孔细胞培养板:用于组织处理的容器
    小型玻璃染色缸:用于组织或切片处理的容器
    切片机:用于组织切片
    明胶化载玻片和盖玻片:用于切片后铺片
    荧光显微镜:用于组织细胞染色后观察分析

    实验步骤
    • 样本固着处理
    1. 用无菌手术刀将新鲜组织切成2毫米厚的组织块
    2. 即刻用无菌镊子夹起组织块,小心放进xx毫升HEPENGBIO清理液(Reagent A中浸泡32
    3. 转移到xx毫升HEPENGBIO固着液(Reagent B
    4. 室温下浸泡孵育24小时,避免光照
    5. 即刻用无菌镊子夹起组织块,小心放进上述xx毫升HEPENGBIO清理液(Reagent A中浸泡1小时
    6. 小心转移到xx毫升HEPENGBIO乳化液(Reagent C里(注意:如果组织已经使用福尔马林固定的,则从这一步骤开始
    7. 56℃恒温培养箱里浸泡孵育48小时,避免光照
    8. 准备16孔细胞培养板,分别加入xx毫升HEPENGBIO净化液(Reagent D3个孔里
    9. 再分别加入xx毫升HEPENGBIO清理液(Reagent A到另外3个孔里
    10. 小心转移组织块到上述6孔板的第一个孔里
    11. 室温下孵育1小时
    12. 转移组织块到上述6孔板的第二个孔里
    13. 室温下孵育1小时
    14. 依次直到第六个孔
    15. 小心转移组织块到新鲜的xx毫升HEPENGBIO氧化液(Reagent E
    16. 4℃冰箱里浸泡孵育24小时,避免光照
    17. 小心转移到20毫升用户自备的无离子水里
    18. 室温下孵育24小时
    19. 小心转移到xx毫升HEPENGBIO修复液(Reagent F
    20. 室温下浸泡孵育24小时,避免光照
    21. 小心转移到20毫升用户自备的无离子水里
    22. 室温下孵育8小时(注意:可以孵育24小时
    23. 用绵纸吸干组织快
    24. 即刻进行常规石蜡包埋过程的基本操作(包括脱水、浸蜡、包埋等)
    25. 取出组织块,进行缓慢石蜡切片,为10微米厚,并铺片在明胶化载玻片上
    • 脱蜡处理
    1. 取出10片待测的5微米厚的石蜡包埋的组织切片
    2. (选择步骤)放进80℃烘箱,孵育30分钟
    3. (选择步骤)室温下静置15分钟
    4. 按下表依次放进小染色缸里孵育
    染色缸 孵育时间
    xx毫升HEPENGBIO脱蜡液Reagent G 15分钟
    xx毫升HEPENGBIO脱蜡液Reagent G 15分钟
    xx毫升HEPENGBIO

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