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- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
2-8℃
- 供应商:
赫澎(上海)生物
产品内容
HEPENGBIO清理液(Reagent A) 毫升
HEPENGBIO固着液(Reagent B) 毫升
HEPENGBIO抗干扰液(Reagent C) 毫升
HEPENGBIO染色液(Reagent D) 毫升
产品说明书 1份
保存方式
保存HEPENGBIO染色液(Reagent D)在-20℃冰箱里,避免光照;其余的保存在4℃冰箱里;有效保证6月
用户自备
荧光显微镜:用于样品染色后观察分析
实验步骤
- 样本固着处理
- 准备1个48孔细胞培养板的细胞或载波片的细胞
- 小心抽去48孔细胞培养板里的培养液
- 小心加入xx微升HEPENGBIO清理液(Reagent A),铺满整个样品表面
- 小心移去HEPENGBIO清理液(Reagent A)
- 重复实验步骤3至4二次
- 小心加入xx微升HEPENGBIO固着液(Reagent B),铺满整个样品表面
- 室温下孵育30分钟
- 小心移去HEPENGBIO固着液(Reagent B)
- 小心加入xx微升HEPENGBIO清理液(Reagent A),清洗样品表面
- 小心移去HEPENGBIO清理液(Reagent A)
- 重复实验步骤9至10二次
- 小心加入xx微升HEPENGBIO抗干扰液(Reagent C),铺满整个样品表面
- 室温下孵育10分钟
- 小心移去HEPENGBIO抗干扰液(Reagent C)
- 小心加入xx微升HEPENGBIO染色液(Reagent D),铺满整个样品表面
- 室温下孵育30分钟,避免光照
- 小心移去HEPENGBIO染色液(Reagent D)
- 小心加入xx微升HEPENGBIO清理液(Reagent A),清洗样品表面
- 小心移去HEPENGBIO清理液(Reagent A)
- 重复实验步骤7至8二次
- 小心加入xx微升HEPENGBIO清理液(Reagent A)
- 即刻在荧光显微镜下观察:激发波长:340nm;散发波长:430nm――胆固醇阳性呈现蓝色荧光
注意事项
- 本产品为50次(48孔细胞培养板)操作
- 操作时,须戴手套
- 操作时,避免污染母液
- 试剂溶液在样品表面时,避免有气泡存在,同时铺满样品表面
- 样品染色完成后,即刻进行荧光显微镜观察
- 荧光容易受到光漂白(photobleach),建议使用HEPENGBIO抗淬灭剂Ⅰ-12058.2
- 本产品使用载玻片细胞染色后,可用于电镜分析
- 本产品适合各种规格的培养细胞:载玻片,载玻片培养皿,35mm培养皿,和各种培养孔板,须相应调整处理液:
| 操作容器 | 建议处理液规格 |
| 载玻片 | 100微升 |
| 载玻片培养皿 | 1毫升 |
| 35mm培养皿 | 1毫升 |
| 96孔培养板 | 100微升 |
| 48孔培养板 | 200微升 |
| 24孔培养板 | 500微升 |
| 12孔培养板 | 1毫升 |
| 6孔培养板 | 2毫升 |
| 25cm2细胞培养瓶 | 3毫升 |
- 本公司提供系列组织细胞生物化学成分染色试剂产品
质量标准
- 本产品经鉴定性能稳定
- 本产品经鉴定荧光清晰
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- 内容
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文献和实验案例一:DAB染色后切片着色一片黄/背景深背景:奥运会期间我们课题组研究生都在实验室做实验,许多从北京购买的试剂买不到,对我们的许多实验产生了很大的影响。我以前一直用中杉金桥的Sp三步法染色试剂盒,效果不错,在奥运会期间我准备做同批实验分不同批次酶免疫组化实验,第一批组化实验结果很好,抗体浓度感觉比较合适(Santa Cruz公司1:200),等做第二批时发现封闭血清不够了,为了保证实验顺利进行,我又从福州迈新顶了一个SP试剂盒,同时抗体稀释液也不够了,我又重新从博士德公司买了一小瓶10
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。具体条件还要摸索。 5)二抗孵育条件 二抗一般室温或 37 ℃ 30 min-1 h,具体时间需要摸索,而浓度一般有工作液,若是浓缩液还要摸索浓度,切记要避光反应。但在免疫荧光中我们一般先把二抗浓度和孵育时间先定下,然后去摸索一抗浓度和孵育时间。最后,荧光素标记的二抗随着保存时间的延长,可能后有大量的游离荧光素残留,需要注意配制时小包装和并进行适当的离心。 6)复染 目的是形成细胞轮廓,从而更好对目标蛋白进行定位。一般常用 DAPI 复染。






