可溶性包涵体蛋白复性（物理透析）试剂盒（10毫升纯化蛋白）

在蛋白纯化和融化过程中，特别是包涵体蛋白，变性剂（denaturant）提供了有效的手段，其获得的纯化蛋白属于变性蛋白（denatured protein）。为了使变性蛋白恢复为天然蛋白（native protein），即具有蛋白质的自然结构和活性，需要进行蛋白复性（renaturation）或重新折叠（refolding）。蛋白复性是一个复杂的过程，诸如pH、离子强度、低分子添加剂、氧化还原电位（redox potential）和温度等物化因子，影响体外蛋白复性的效率。通常体外复性的方法包括稀释法和缓冲交换法。前者通过化学处理，而后者采用物理方法（例如透析、膜过滤（diafiltration）、凝胶过滤层析（gel-filtration chromatography）等，以达到蛋白复性的效果。物理透析具有自然复性，减少化学干扰。

产品内容

HEPENGBIO透析液（Reagent A） 毫升
HEPENGBIO透析袋 个
产品说明书 1份

保存方式

保存在4℃冰箱里， 避免光照，有效保证3月

用户自备

2升烧杯：用于样品保存的容器
4℃冰箱：用于反应孵育

实验步骤

1. 准备好可溶性纯化变性蛋白样品
2. （选择步骤）加入适量的HEPENGBIO透析液（Reagent A）调整蛋白浓度到1毫克/毫升

1. 移取xx毫升蛋白样品到HEPENGBIO透析袋或自备透析袋（注意：封闭，没有渗漏）
2. 放入2升烧杯中
3. 加入xx毫升HEPENGBIO透析液（Reagent A）
4. 放进4℃环境中，磁力搅拌16小时（注意：4小时后可以更换一次透析液）
5. 收集样品（注意：用户可以使用新鲜的HEPENGBIO透析液（Reagent A）或自备蛋白稀释液进行稀释处理）
6. （选择步骤）移取100微升进行生物检测，例如蛋白功能或活性：比色法、HPLC、受体结合实验等确定复性蛋白活性值
7. 即刻放进－70℃冰箱里保存

注意事项

1. 本产品为1次（10毫升样品）操作
2. 操作时须戴手套
3. 本产品的复性效率达80％
4. 建议与本公司系列包涵体蛋白溶解试剂盒配套使用
5. HEPENGBIO透析袋使用前，置于60℃无离子水浸泡10分钟后，方可使用
6. 如果蛋白样品在室温下较为稳定，且活性不受影响，可以使用室温下透析处理，效果（产率和可溶性）更佳
7. 由于样品的特异性，用户可以优化温度（4度或室温）、孵育时间（4小时至16小时）、蛋白容量（5至15毫升），以获得大复性效率
8. 透析袋为3.5Kd临界值
9. 本公司提供系列包涵体蛋白处理试剂产品

质量标准

1. 本产品经鉴定性能稳定
2. 本产品经鉴定无蛋白酶污染