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- 2025年11月06日
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赫澎（上海）生物
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文献和实验表达，以此来进行选择最后的融合位置。 表 1. 常用荧光蛋白特性 荧光素酶 荧光素酶（Luciferase）是自然界中能够催化荧光素产生生物发光的酶的统称，其中主要有萤火虫荧光素酶（Firefly luciferase，FLuc）和海肾荧光素酶（Renilla luciferase，RLuc）。荧光素酶报告系统非常灵敏，可以高效地检测基因的表达和细胞的活动情况，是分析转录因子与启动子活性、miRNA 与靶基因相互作用以及活体成像等的有效方法。 萤火虫荧光素酶（FLuc）：FLuc 的底物是荧光素，催化
；此外还有Renilla（海肾）荧光素酶，只有36KD大小的蛋白，底物是腔肠素，只需要氧气，不需要ATP，发蓝色光，一直是萤火虫荧光素酶的替代，并常与萤火虫荧光素酶组合成为双色检测，或者作为内对照。 那么，让我们来看看现在有哪些新荧光素酶了？ 1. Gaussia荧光素酶，这是一种分泌型的蓝色荧光素酶，蛋白分子量更小，只有22KD，含有天然的分泌型信号肽，可以引导荧光素酶分泌到细胞培养上清中，从而无需裂解细胞即可检测报告基因活性。所表达的荧光素酶85%以上都会分泌至胞外，不过由于这种分泌型荧光素酶产生的信号
随着他们这些显著的优点，BL/CL技术同样也有一些缺陷。从实践的观点来看，BL/CL技术与传统的分光光度测定和荧光技术相比，更容易基质的影响。当然，BL/CL检测中的化学反应会被基质中的成分影响（通常是淬灭）。此外，酶或发光蛋白也和CL底物一样，相对荧光分子不稳定。另一个限制因素是，相比分光光度和荧光测量的仪器，BL/CL检测的仪器通常的实验室中此类仪器比较少，特别是需要高灵敏度检测时，所需要的仪器通常非常贵。 随着新的生物技术工具的不断产生，BL/CL将进一步得到发展。其中一部分是对新的BL报告基因的发现
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