活细胞/凋亡细胞/坏死细胞鉴别试剂盒(AO/EB法.荧光显微

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活细胞/凋亡细胞/坏死细胞鉴别试剂盒(AO/EB法.荧光显微镜)厂商
品牌：百奥莱博
产地：国产|进口
规格：50T|100T
编号：KFS250
细胞坏死和凋亡是两种截然不同的细胞学现象，二者发生的过程在形态学上有很大的区别。在细胞坏死时，细胞膜发生渗漏，细胞内容物包括细胞器以及染色质释放到胞外。而在细胞凋亡过程，起始阶段，染色质固缩、分离并沿核膜分布，细胞质亦发生固缩，但细胞膜依然完整未失去选择透性；在凋亡后期，核染色质断裂为大小不等的片断，与某些细胞器如线粒体一起聚集，为反折的细胞膜所包围，以后逐渐分离，形成凋亡小体。

本产品提供的染料可以分别对正常细胞、凋亡细胞和坏死细胞的细胞核进行染色。其染色原理为：DyeReagent 1 只进入活细胞，正常的细胞核及处于凋亡早期的细胞核呈现绿色；Dye Reagent 2 只能进入死细胞，将死细胞以及凋亡晚期的细胞核染成橙色。因此通过在荧光显微镜下观察细胞显色和形态的不同，可以同时将正常细胞、坏死细胞、凋亡早期细胞和凋亡晚期细胞区分开来。

注意事项
1. Dye Reagent 1、2 及Mixed Dyes Reagent 有毒，操作时请戴手套；
2. 最好根据需要检测的实际样品数在使用前将两种染料混合，剩余混合染液注意避光保存留待下次使用；
3. 利用血球计数板进行该项操作时，不要用血计板配套的那种质地较硬的盖玻片，而用普通的盖玻片反而更利于结果的观察。

操作方法
1. 用适当的方法诱导细胞凋亡；
2. 用PBS 洗涤细胞二次，并配成浓度为5×105~6×106cells/ml 细胞悬液；
3. 将Dye Reagent 1 和Dye Reagent 2 等体积混合形成Mixed Dyes Reagent（见注意事项2）；
4. 吸取25μL 的细胞悬液同1μL 的Mixed Dyes Reagent 轻轻混匀；
5. 吸取上述10μL 的混合液置于一洁净的载玻片，并用盖玻片盖上细胞（见注意事项3）；
6. 荧光显微镜510nm 激发波长观察，分别对下列四类细胞进行计数，注意细胞总量须超过200 个。

储存：2-8℃，避光，有效期12个月。
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·2%封闭试剂
编号：KFS071
规格：500ml

·Caspase 2荧光法检测试剂盒(AFC)
编号：KFS201
英文名称：Caspase-2 Fluorescence Metric Assay
规格：20T|50T|100T
本试剂盒适用于培养细胞及新鲜组织Caspase-2 检测。Caspase 家族在介导细胞凋亡的过程中起着非常重要的作用，其中Caspase-2 为关键的执行分子，与DNA 断裂、染色质凝聚和凋亡小体形成有关。Caspase-2 在正常状态下以酶原的形式存在于胞浆中，没有活性；但在细胞发生凋亡阶段，它被激活，活化的Caspase-2 由两个大亚基和两个小亚基组成，裂解相应的胞浆胞核底物，最终导致细胞凋亡。Caspase-2 荧光检测试剂盒就是将Caspase-2 序列特异性的多肽偶联至发色基团。当底物被Caspase-2 剪切后，发色基团即游离出来，可通过荧光酶标仪测定其荧光强度（激发波长=485nm,发射波长=535nm）。

注意事项
1. Caspase-2 Substrate 避光保存及使用。
2. 对某些凋亡诱导剂引起的细胞凋亡可能存在非依赖于Caspase-2 活化的机制，这种情况时利用本试剂盒检测Caspase-2 活性无明显改变，需要考虑凋亡机制中的其他信号通路。
3. 细胞数量需达到3~5×106 个或新鲜组织50~100mg，以便能达到测定需要的100~200μg 蛋白的要求，因为Caspase-2 的活性与细胞裂解液的蛋白含量有关，如测定的RFU 值偏低，可以通过适当延长反应的时间，如果值还是不高，可通过增加细胞数量或组织量的方法来提高蛋白量。


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ARB11359 人类组织相容性复合体I类相关基因A(MICA)检测服务 Human mica ELISA KIT
BTN100832 四氮唑蓝 NBT
F020102 兔抗牛血清白蛋白抗体 Rabbit Anti-BSA
9002-04-4 Thrombin 凝血酶
PY02-395 A1培养基 250克
ARB11376 人前列腺酸性磷酸酶(PAP)elisa检测操作说明书 Human prostatic acid phosphatase,pap ELISA KIT
SJ0738 大鼠中性粒细胞分离液
BOC-硝基-L-精氨酸 CL-HOBT 2188-18-3
BL0968 封闭用驴血清(冻干粉)
BL1442 X-gal(20mg/ml)
ARB11316 人促黄体激素(LH)尿液中含量检测 Human luteotropic hormone,lh ELISA KIT
ARB12785 小鼠α干扰素(IFN-α)ELISA检测服务 Mouse interferon α,ifn-α ELISA KIT
磷酸组胺 Coronene 23297-93-0
TF0101 GenFectinTM基因转染试剂
尿苷二磷酸葡萄糖 D-Fructose 28053-08-9
ARB12342 大鼠补体片断5A(C5A)elisa检测说明书 Rat complement fragment 5a,c5a ELISA KIT
ET106 HotMaster DNA polymerase
517-28-2 Hematoxylin 苏木色精
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·Caspase-9蛋白检测试剂盒
编号：KFS222
英文名称：Caspase-9 Detection Assay(Western Blot)
规格：50T
本试剂盒用于从哺乳动物组织和培养细胞中提取全蛋白， 用含有蛋白酶抑制剂及磷酸酶抑制剂的裂解缓冲液LysisBuffer 匀浆裂解组织或细胞，作用温和，提取过程简便高效。获得的全蛋白可用于Western Blot、免疫共沉淀等后续研究（本试剂盒包含兔抗Caspase-9抗体），但不能用于蛋白激酶及磷酸酶免疫共沉淀的研究，因本试剂盒中包括这两种酶的抑制剂。

·高尔基体绿色荧光探针
编号：KFS127
英文名称：GolgiGreen
规格：200μg
高尔基体绿色荧光探针GolgiGreen（NBD C6-神经酰胺）可以用来研究神经鞘脂类的运输和代谢机制，也可以用来作为活细胞或固定细胞内高尔基体的选择性染料。NBD 染料对于环境敏感，在水中荧光信号微弱，但是在非质子溶剂和非极性环境中荧光增强，Ex/Em=466/536nm。

化学名称：C6-NBD-CERAMIDE
分子式：C30H49N5O6
分子量：575.74

储存：-20℃，避光，有效期一年。

·即用型DAPI染色液
编号：KFS257
英文名称：GolgiGreen
规格：10ml|50ml
DAPI（4,6-Diamidino-2-phenylindole ，4,6-二氨基-2-苯基吲哚）是一种DNA 特异性染料，与DNA产生非嵌入式结合，发出蓝色荧光。该染料对细胞膜有半通透性，可透过正常活细胞产生较弱的蓝色荧光（细胞固定后荧光增强），而凋亡细胞的膜通透性增加，对其摄取能力增强，产生很强蓝光染色。

正常细胞的核形态呈圆形，边缘清晰，染色均匀，而凋亡细胞的细胞核边缘不规则，细胞核染色体浓集，着色较重，并伴有细胞核固缩，核小体碎片增加，因此从荧光强度及核形态均可鉴别出细胞发生凋亡的典型特征。

操作方法（本方法针对贴壁细胞，但不仅限于贴壁细胞）
1. 贴壁培养的细胞爬片弃去培养基，10mM PBS，pH7.4，洗一次；
2. 再滴加入100μL 的DAPI 染液，室温避光染色5-15 min；
3. 弃去染色液，PBS 漂洗一次，
4. 滴加甘油或Buffer A，荧光显微镜以340/380nm 紫外光激发，500×（40×12.5）（最好是100×油镜头）观察、拍照。

储存：2-8℃，避光，有效期6个月。

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