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活细胞/凋亡细胞/坏死细胞鉴别试剂盒(AO/EB法.荧光显微

镜)
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  • 上海莼试
  • CSX9711
  • 进口、国产
  • 2025年10月28日
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    • 英文名

      Normal/Apoptotic/Necrotic Cell Detection Kit

    • 保质期

      有效期一年

    • 供应商

      上海莼试

    • 保存条件

      -20℃避光保存

    • 规格

      详见说明书

    细胞生物学研究有以下几个方面。
    细胞生物学的研究内容十分广泛,主要包括。
    ①细胞核、染色体以及基因表达的研究。
    ②生物膜与细胞器的研究。
    ③细胞骨架体系的研究。
    ④细胞增殖及其调控。
    ⑤细胞分化及其调控。
    ⑥细胞的衰老与编程性死亡(凋亡)。
    ⑦细胞的起源与进化。
    ⑧细胞工程。
    中文名称:活细胞/凋亡细胞/坏死细胞鉴别试剂盒(AO/EB法.荧光显微镜)
    英文名称:Normal/Apoptotic/Necrotic Cell Detection Kit

    产品规格:50T|100T
    发货周期:1~3天
    细胞坏死和凋亡是两种截然不同的细胞学现象,二者发生的过程在形态学上有很大的区别。在细胞坏死时,细胞膜发生渗漏,细胞内容物包括细胞器以及染色质释放到胞外。而在细胞凋亡过程,起始阶段,染色质固缩、分离并沿核膜分布,细胞质亦发生固缩,但细胞膜依然完整未失去选择透性;在凋亡后期,核染色质断裂为大小不等的片断,与某些细胞器如线粒体一起聚集,为反折的细胞膜所包围,以后逐渐分离,形成凋亡小体。
    本产品提供的染料可以分别对正常细胞、凋亡细胞和坏死细胞的细胞核进行染色。其染色原理为:DyeReagent 1 只进入活细胞,正常的细胞核及处于凋亡早期的细胞核呈现绿色;Dye Reagent 2 只能进入死细胞,将死细胞以及凋亡晚期的细胞核染成橙色。因此通过在荧光显微镜下观察细胞显色和形态的不同,可以同时将正常细胞、坏死细胞、凋亡早期细胞和凋亡晚期细胞区分开来。
    操作方法
    1. 用适当的方法诱导细胞凋亡;
    2. 用PBS 洗涤细胞二次,并配成浓度为5×105~6×106cells/ml 细胞悬液;
    3. 将Dye Reagent 1 和Dye Reagent 2 等体积混合形成Mixed Dyes Reagent(见注意事项2);
    4. 吸取25μL 的细胞悬液同1μL 的Mixed Dyes Reagent 轻轻混匀;
    5. 吸取上述10μL 的混合液置于一洁净的载玻片,并用盖玻片盖上细胞(见注意事项3);
    6. 荧光显微镜510nm 激发波长观察,分别对下列四类细胞进行计数,注意细胞总量须超过200 个。
    储存:28℃,避光,有效期12个月。
    产品细节图片1
    注意事项:
        活细胞/凋亡细胞/坏死细胞鉴别试剂盒(AO/EB法.荧光显微镜)尽管经测试Annexin V-FITC反复冻融5次对于其检测效果无显著影响,但为取得良好的使用效果,3-6个月内推荐4℃保存,并适当注意避免反复冻融。
          如果有细菌或真菌污染,会严重影响检测效果。
          染色后宜尽快检测,时间过长可能会导致凋亡或坏死细胞的数量增加。
          如果细胞收集过程中使用了胰酶,需注意设法去除残留的胰酶。残留的胰酶会消化并降解Annexin V-FITC,导致染色失败。
          荧光物质均易发生淬灭,在进行荧光观察时,尽量缩短观察时间,同时在操作和存放过程中也尽量注意避光保存。
          用于流式细胞仪检测时,如果发现Annexin V-FITC单独染色时出现了过多的PI假阳性细胞,并且通过调整相关设置和参数也无法改善,可以用PBS将Annexin V-FITC稀释3-10倍后再进行检测,这样通常可以有效减少假阳性的坏死细胞。
          需自备PBS。
          本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
          为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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    细胞培养的优点:
    1.研究的对象是活细胞
    在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
    2.研究条件可以人为控制
    pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。
    3.研究的样本可以达到比较均一性
    通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
    4.研究内容便于观察、检测和记录
    采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。

     

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