Annexin V Alexa Fluor488/7-AAD

特别提示：包括Annexin V Alexa Fluor488/7-AAD细胞凋亡检测试剂盒在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：Annexin V Alexa Fluor488/7-AAD细胞凋亡检测试剂盒
产品货号：HR8282
产品规格：50T/100T



除了Annexin V Alexa Fluor488/7-AAD细胞凋亡检测试剂盒,，我公司还供应以下相关产品：



名称：细胞凋亡染色试剂盒(细胞Hoechst染色)
货号：YT118
规格：100次
本试剂盒提供了一种经典而又快速简便的细胞凋亡检测方法。细胞发生凋亡时，染色质会固缩。所以Hoechst 33258染色后，在荧光显微镜下观察，正常细胞的细胞核呈正常的蓝色，而凋亡细胞的细胞核会呈致密浓染，或呈碎块状致密浓染，颜色有些发白。典型的Hoechst 33258染色后的细胞图片参考下图。



试剂盒特点：
1. 只需25分钟即可完成细胞凋亡检测的整个过程。
2. 本试剂盒提供了固定液，染色液，及抗荧光淬灭封片液。
3. 本试剂盒对贴壁细胞，悬浮细胞和组织切片均适用。
4. 足够检测100个样品。

试剂盒组份：
固定液————————————50ml
Hoechst 33258染色液 —————50ml
抗荧光淬灭封片液 —————— 5ml

注意事项：
1. 需可以观察蓝色荧光的荧光显微镜或激光共聚焦显微镜。
2. 需PBS或0.9%NaCl溶液。
3. 荧光物质均易发生淬灭，染色后的样品宜避光保存。
4. 在使用抗淬灭封片液的情况下可以减缓淬灭，但仍宜尽量避光。

储存条件：4℃，有效期6个月。

名称：TUNEL检测阳性对照制备试剂盒
货号：YT134
规格：10次
本试剂盒可以用于TUNEL检测阳性对照的制备，制备后的阳性对照可以用于一步法TUNEL细胞凋亡检测试剂盒(YT135)的荧光，也可以用于显色法TUNEL细胞凋亡检测试剂盒(YT137)的显色检测。DNase I可以剪切基因组DNA，使基因组DNA产生片段化(fragmentation)。基因组被片段化的细胞在用TUNEL法检查时会呈阳性染色。本试剂盒足够制备10个阳性对照。

试剂盒组份：
DNase I—————————10μl
Reaction Buffer(10X)——200μl

注意事项：需自备用于TUNEL检测的组织切片、或培养细胞的片子。需自备TUNEL检测试剂盒。

储存条件：-20℃。

名称：Hoechst 33258染色液
货号：YT893
规格：10ml|50ml
本Hoechst 33258染色液可直接用于固定细胞或组织的细胞核染色，也可直接用于活细胞或组织的细胞核染色。Hoechst 33258是一种可以穿透细胞膜的蓝色荧光染料，对细胞的毒性较低。

Hoechst 33258染色常用于细胞凋亡检测，染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测。Hoechst 33258也常用于普通的细胞核染色，或常规的DNA染色。

Hoechst 33258的最大激发波长为346nm，最大发射波长为460nm；Hoechst 33258和双链DNA结合后，最大激发波长为352nm，最大发射波长为461nm。

CAS：23491-45-4
分子式：C25H24N6O·3HCl
分子量：533.88

注意事项：
1. 本Hoechst 33258 染色液的浓度经过百奥莱博的优化，确保可以满足各种常规染色的需要。如需使用特定浓度的Hoechst 33258，请选购百奥莱博的Hoechst 33258(YT892)。如需染色活细胞或培养的组织，请选购百奥莱博的Hoechst 33342活细胞染色液(100X) (YT896)，效果更佳。
2. 荧光染料都存在淬灭的问题，建议染色后尽量当天完成检测。活细胞或组织染色后宜立即观察。
3. 为减缓荧光淬灭可以使用抗荧光淬灭封片液。抗荧光淬灭封片液(YT097)可以向百奥莱博订购。

储存条件：-20℃避光，有效期一年。

名称：细胞凋亡线粒体膜电位检测试剂盒(JC-1)
货号：KFS212
规格：10T|20T|50T|100T
本试剂盒可应用于细胞、组织或纯化的线粒体膜电位检测。大量的研究表明线粒体与细胞凋亡密切相关，其中线粒体跨膜电位（△）的破坏，被认为是细胞凋亡级联反应过程中最早发生的事件之一，它发生在细胞核凋亡特征（染色质浓缩、DNA断裂）出现之前，一旦线粒体跨膜电位崩溃，则细胞凋亡不可逆转。

本试剂盒采用JC-1(5,5’,6,6’-tetrachloro-1,1’,3,3’-tetraethylbenzimidazolcarbocyanine iodide)一种阳离子脂质荧光染料作为检测线粒体跨膜电位指示剂。JC-1有单体和多聚体两种存在状态，在低浓度时以单体的形式存在，高浓度时以多聚体形式存在，两者的发射光谱不同，但均可在流式细胞仪绿色（FL-1）通道检测出绿色荧光，JC-1可透过正常细胞膜以单体状态聚集胞内，正常健康线粒体的膜电位（△）具有极性，JC-1依赖于△的极性被迅速摄入线粒体内，并因浓度增高而在线粒体内形成多聚体，多聚体发射光为红色荧光；可被流式细胞仪的红色（FL-2）通道检测到，而细胞发生凋亡时，线粒体跨膜电位被去极化，JC-1从线粒体内释放，红光强度减弱，以单体的形式存在于胞质内发绿色荧光。根椐这一特征检测线粒体膜电位的变化。

注意事项
1. 微量试剂取用前请离心集液。
2. JC-1 避光保存及使用。
3. 细胞培养至汇合度80-90%，收集细胞量在1×106/Test。
4. 对PH 变化过于敏感的细胞建议用胎牛血清取代Buffer 孵育染色及洗涤，或延长观测时间。
5. 流式细胞仪检测线粒体膜电位变化受到多种因素的影响，因诱导剂、细胞株类型，作用时间的不同而荧光强度比例都有不同，因此没有通用标准的补偿设门指南，因此每个试验需设阴性及阳性对照组进行荧光补偿及设门。
6. 组织需先制备单细胞悬液或提取纯化线粒体后方可进行检测，可选用我司细胞悬液制备试剂盒或线粒体提取试剂盒。

名称：Hoechst 33342/PI双染试剂盒
货号：SY0500
规格：100T
Hoechst 33342/PI 双染试剂盒（Hoechst 33342/PI Double Stain Kit）采用Hoechst 33342和碘化丙啶（PI）双染的方法以区分凋亡细胞和坏死细胞的试剂盒。其检测原理是：细胞核荧光染料Hoechst 33342可以穿透细胞膜，嵌入双链DNA后释放蓝色荧光。对于正常细胞，其可少许进入细胞膜使其染上低蓝色。而凋亡细胞由于细胞膜通透性增强，从而使得进入凋亡细胞内的Hoechst 33342明显多于正常细胞，荧光强度比正常细胞要高。另外，细胞发生凋亡时染色质会固缩，从而使得染料能更有效和聚集的结合于DNA，并且凋亡细胞膜上的p-糖蛋白泵功能受损而不能有效的将Hoechst 33342排除到细胞外使其在细胞内的积累增加，这些特征都使得凋亡细胞经染色后荧光会比正常细胞明显增强。但细胞核荧光染料PI不能穿透细胞膜完整的正常细胞或凋亡细胞，即活细胞对PI染料拒染。而对于坏死细胞，其细胞膜的完整性在早期即已丧失，可被PI染色。

经上述两种染料双染后，使用流式细胞仪或荧光显微镜检测时，正常细胞为弱红色荧光＋弱蓝色荧光，凋亡细胞为弱红色荧光＋强蓝色荧光，坏死细胞为强红色荧光＋弱蓝色荧光。

本试剂盒染色快速方便，可用一步法或者两步法进行染色。使用流式细胞仪检测时，无需稀释等配制过程，也无需再准备其它任何溶液。本试剂盒足够检测100个样品，每个样品的细胞数量可达105-106个。

注意事项
1) Hoechst 33342、PI对人体有害，请注意适当防护；
2) Hoechst 33342、PI需避光，整个实验过程尽量避光操作；
3) 荧光染料均存在淬灭情况，建议染色后需尽快检测；
4) Hoechst 33342 与细胞孵育时间不宜过长，一般控制在20min以内。太长容易引起该染料的发射光谱由蓝光向红光迁移，导致红色荧光和蓝色荧光比例改变。
5) 如果用于组织样品检测，则必须把组织消化制备成单细胞悬浮液后才可以进行检测。
6) 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

储存条件：-20℃，有效期12个月

名称：Caspase 8抑制剂
货号：HR0478
规格：200μl
Z-IETD-FMK是一种高效可逆的caspase-8的小分子抑制剂。可以抑制由Caspase 8激活导致的细胞凋亡。Z-IETD-FMK分子量为654.7。
Z-IETD-FMK采用进口高品质原料分装配制，浓度为5mM。本产品适用于需要用到Z-IETD-FMK的各种实验，请根据不同的实验需要进行配制和使用，具体请参考相关文献或实验指南。

储存条件：-20℃保存。
有效期：一年。

注意事项：
本品为DMSO溶液，冬季气温较低时在室温时为凝固状态，极易粘附在管壁、吸头壁。注意需要加热溶解，吸头也需要放在培养箱预热，否者容易再次凝固在吸头内壁产生损耗。融解后离心至管底部再打开螺旋盖。

使用方法：
根据不同的实验需要进行配制和使用，具体请参考相关文献或实验指南。Z-IETD-FMK溶液可根据需要的浓度加入相应的培养基中，然后过滤培养基除菌，处理细胞。

名称：细胞周期检测试剂盒
货号：HR0408
规格：20T/50T/100T
细胞周期(cell cycle)是指细胞从前一次分裂结束起到下一次分裂结束为止的活动过程，通常由G0/G1 期、S 期、G2 期和M 期组成。G1 期：细胞开始RNA和蛋白质的合成，但DNA含量仍保持二倍体。S 期：DNA 开始合成，这时细胞核内DNA的含量介于G1 期和G2 期之间。当DNA 复制结束成为4倍体时，细胞进入G2 期。G2 期的细胞继续合成RNA及蛋白质，直到进入M 期。因此，单纯从DNA含量无法区分G2 期和M 期。一旦有丝分裂发生，细胞分裂成两个细胞，这两个细胞或者进入下一个细胞周期，或者进入静止期(G0期)，而G0 期从DNA含量上同样无法与G1 期区分。因此，整个复制周期可以描述为G0/G1、S、G2/M 期。通过核酸染料PI标记DNA,并由流式细胞仪进行分析，可以得到细胞各个时期的分布状态，计算出G0/G1%、S%、G2/M%，了解增殖能力，在肿瘤病理学研究中，通常以S 期细胞比率作为判断肿瘤增殖状态的指标。
PI 为插入性核酸荧光染料，能选择性的嵌入核酸DNA和RNA 双链螺旋的碱基之间与之结合，其结合的量与DNA的含量成正比例关系，用流式细胞仪进行分析，就可以得到细胞周期各个阶段的DNA分布状态，从而计算出各个期的百分含量。PI染色后，假设G0/G1期细胞的荧光强度为1，那么含有双份基因组DNA的G2/M 期细胞的荧光强度的理论值为2，正在进行DNA 复制的S 期细胞的荧光强度为1-2 之间。
细胞周期检测试剂盒是利用细胞内DNA 能够和荧光染料结合的特性，细胞各个时期其DNA含量不同从而结合的荧光染料不同，流式细胞仪检测的荧光强度也不一样来检测细胞周期。

储存条件：-20℃避光保存。
有效期：一年。

注意事项：
1．细胞处理需要小心操作,尽量避免人为的损伤细胞。
2．固定时在振荡器上轻轻振荡细胞，并缓慢滴加75%乙醇，直接加入会导致细胞团聚的现象，很难重悬成单细胞。或者先用冷PBS 悬浮细胞，充分悬浮，使细胞充分分散成单细胞。之后缓慢加入无水乙醇，终浓度为70-75%乙醇。乙醇固定之后须无细胞沉淀。
3．为防止不同批次细胞在实验时本身所出周期不同导致重复性差，可以在实验前进行细胞的同步化处理，减少批间差异。实验细胞应处于对数生长期，不能是完全长满，一般在50～80%比较好。
4．分析的时候需要的是单个的细胞，400 目筛网过滤是用来将粘在一起的细胞团滤掉，否则会出现人为的多倍体干扰，不过如果经验丰富的操作人员也可以gate掉。如果没有条件过滤，请在染色之前将细胞弹的很散，再进行染色。
5．组织处理方法：用剪刀将组织剪成小块，用 0.25%胰酶消化30min－1h，200－400目筛网过滤细胞，获得单细胞悬液。如组织难以消化，可加入适量胶原酶。

试剂盒以外自备试剂和仪器：
● PBS ● 纯水● 移液器及吸头 ● 流式细胞仪

使用方法：

使用注意事项：
● 细胞处理需要小心操作,尽量避免人为的损伤细胞。
● 最好使用含EDTA的细胞消化液。
● 洗涤细胞离心转速不可超过800g。
● 乙醇固定时离心大概采用2000g力5分钟，离心力太小可能部分细胞难以沉淀。

1．收集样本细胞，细胞数量在1-5×106个。
2．用冷PBS 洗涤细胞两次。
【注】：800g左右，离心5分钟，小心吸取上清，避免吸走细胞。
3．70%-75%冰冻乙醇-20℃固定1小时或4℃固定过夜。
【注】：轻轻吹打混匀，避免细胞成团；不能太剧烈，防止细胞损伤成碎片。
到此步可以存放，-20℃保存样品，1周内样品检测不受影响。
4．用冷PBS 洗涤细胞一次。
5．用200-500μl冷PBS重悬细胞。
6．加入Rnase A溶液20μl 37℃水浴30分钟。
7．400 目筛网过滤。
【注】：无细胞筛网可以不做此步骤。
8．加入400μl PI染液，轻轻混匀后4℃避光孵育30分钟-1小时。
【注】：染色完成后宜在24h内完成流式检测。
9．流式检测结果。激发波长为488nm。采用适当分析软件进行细胞DNA含量分析和光散射分析。