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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
2-8℃
- 保质期:
12个月
- 英文名:
Normal/Apoptotic/Necrotic Cell Detection Kit
- 库存:
现货
- 供应商:
凯基生物
- 规格:
50 tests
本产品提供的染料可以分别对正常细胞、凋亡细胞和坏死细胞的细胞核进行染色。其染色原理为:Dye Reagent 1 只进入活细胞,正常的细胞核及处于凋亡早期的细胞核呈现绿色;Dye Reagent 2 只能进入死细胞,将死细胞以及凋亡晚期的细胞核染成橙色。因此通过在荧光显微镜下观察细胞显色和形态的不同,可以同时将正常细胞、坏死细胞、凋亡早期细胞和凋亡晚期细胞区分开来。
实验类型: 细胞凋亡鉴定
检测方法: 荧光成像
保存条件: Store at 2-8 for 12 months ℃ , protected from light
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文献和实验AO / EB原理与流程zhongyisheng:1、原理:吖啶橙(AO)能透过胞膜完整的细胞,嵌入细胞核DNA,使之发出明亮的绿色荧光。溴乙锭(E仅能透过胞膜受损的细胞,嵌入核DNA,发橘红色荧光。凋亡的细胞呈现为染色增强,荧光更为明亮,均匀一致的圆状或固缩状、团块状结构。非凋亡细胞核呈现荧光深浅不一的结构样特征。二者形态迥然相异,很易判别。在荧光显微镜下观察,可见四种细胞形态:活细胞(VN),核染色质着绿色并呈正常结构;早期凋亡细胞(VA),核染色质着绿色呈固缩状或圆珠状;非凋亡的死亡
贴壁后加入2mg/L As2O3药物. 置37℃ 50mL/L CO2孵箱培养,按预定时间,将细胞全部收集离心,弃上清加入PBS洗十次,制成细胞悬液,吸200μL,加入8Μl AO/EB染液,充分混匀,滴于玻片上,分别计数. 早期凋亡细胞(VA)核染色质着绿色,呈固缩状或圆珠状. 晚期凋亡细胞(NVA)核染色质着桔红色,呈固缩状或破裂状. 坏死细胞(NVN)核染色质着桔红色,呈正常细胞结构. 活细胞(VN)核染色质着绿色,呈正常细胞结构. 细胞凋亡率按以下公式计算: 细胞凋亡率%=VA+NVA
的DNA片段。 对于晚期检测通常有以下方法: (1)TUNEL(末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记) (2)LM-PCR Ladder (连接介导的PCR检测) (3) Telemerase Detection (端粒酶检测) 形态学观察 普通光学显微镜观察;透射电子显微镜观察;荧光显微镜观察 普通光镜下观察: 用苏木素-伊红(HE)染色:细胞核固缩碎裂、呈蓝黑色、胞浆呈淡红色(凋亡细胞),正常细胞核呈均匀淡蓝色或蓝色,坏死细胞核呈很淡的蓝色或蓝色消失 Giemsa










