促红细胞生成素（EPO）酶免检测试剂盒

预期用途
促红细胞生成素（EPO）酶免检测试剂盒用于人血清中EPO的定量检测，用于体外诊断，还可辅助贫血症和红血球增多症的诊断。随着重组EPO的出现，它可作为生物治疗增加红细胞数量，那么EPO试验就可用于辅助贫血症病人的预测和用药过程的观察。

简介
EPO是分子量为30000-340000道尔顿的糖蛋白，人EPO是由165个氨基酸组成的多肽，包含有一个O-连接和3个N-连接的糖链。重组EPO在免疫试验中是天然蛋白的良好替代品。血清中的EPO水平由蛋白的生成率和清除率决定，90%的EPO由成人肾脏的肾小管细胞产生，组织氧化中会降低。现象表明，这些细胞中用于检测血氧饱和度的蛋白是一种血红素基团，随着血浆中的氧分压的降低，EPO浓度会增加，这也提示我们在正常的细胞内，血清中EPO浓度与红细胞量呈负相关关系。

血清中EPO浓度的定量检测可辅助贫血或红细胞增多症的诊断。再生障碍性贫血，溶血性贫血和贫血都是由于缺铁导致海拔血清EPO。而继发性贫血患者体内的EPO水平是由于肾功能衰竭和其他疾病如获得性免疫缺陷综合征（AIDS）引起，这就是最有可能由于肾脏受损而引起的EPO大量产生的原因。低浓度的EPO可对肾移植排斥反应做出早期预警，还可以用于监测艾滋病人使用AZT的治疗过程，EPO浓度的增加表明贫血与AZT治疗相关联是由于红细胞发育不全或apliasia红血球增多症，或原发性红细胞增多症（红细胞量增加）起因于红细胞未受到刺激，因此，血红蛋白的增加引起EPO的减少，导致血清中EPO水平降低。继发性红血球增多症，也是总红细胞数增加，循环EPO水平提高的生理反应，引起了组织缺氧，缺氧因素可能有肺纤维化，心血管疾病，长期暴露在高海拔地区，异常形式的血红蛋白和药物治疗。一些肿瘤也会产生EPO，这种情况下，EPO可作为监测有效治疗的肿瘤标记物。

实验原理
促红细胞生成素（EPO）酶免检测试剂盒采用的是双位点酶联法，检测具有生物活性的EPO氨基酸链，采用看两种不同的鼠单抗与人EPO特异性结合。一个是生物标记的鼠单抗，另外一个是HRP标记鼠单抗。
试验中，标准品，质控品或是样品与酶标抗体和生物素标记抗体一起在链霉亲和素包被的微孔板内孵育，孵育结束后，洗去未结合的成分，再加入TMB底物液孵育，终止液加入终止反应，颜色变为黄色。黄色强度与样品中的EPO成正比，标准品的浓度和OD值绘制标准曲线，质控和样本中的EPO浓度可直接从标准曲线上读取。标准品已经WHO EPO国际标准认证，WHO参考标准品是EPO第一国际标准（87/684）

注意事项

1. 仅供体外诊断和研究
2. 实验前，认真阅读说明书，确保所有操作都已理解
3. 如果试剂盒有破坏的请与IBL公司联系或是提交您的投诉单，但自您拿到试剂盒后最迟不超过一个星期。严重破损的成分不能用于实验，将其保存好直至找到最终的解决办法。之后，按照官方条例将其处理掉。
4. 确认批号和有效期，不要将不同批号的试剂混合，不要使用过期试剂。
5. 具备良好的实验操作和安全意识，穿戴实验服，一次性手套和护目镜
6. 试剂中含有危险性物质，可能会刺激眼睛和皮肤，见“MATERIALS SUPPLIED”和标签。MSDS可在IBL主页上找到或直接向IBL公司索要
7. 化学物质或是准备试剂都应根据国际生化危险和安全法规来操作
8. 避免接触终止液，可能会引起皮肤刺激或烧伤
9. 试剂A，洗涤浓缩液，EPO标准液和指控都含有环丙沙星防腐剂，对药物敏感的人避免接触，女性或孕妇应避免接触环丙沙星
10. 试剂1，生物素标记的EPO抗体含有Proclin300防腐剂，处理时应戴手套，如果皮肤接触到了，应立即用中性肥皂和清水清洗，如果眼睛接触到了，则用水冲洗15min，若吞咽了，避免呕吐，喝大量水，立即看医生
11. 试剂盒中的所有试剂包括检测过的人血清/血浆对HIV/II，HbsAg和HCV都表现为阴性，但是试剂中会出现此类病毒（HIV/II，HbsAg和HCV）或其他具有感染性的病原体的可能性都不能完全被排除。因此，所有的试剂在使用和处理的过程中都应当作潜在生物有害物质进行处理。

储存和稳定性
促红细胞生成素（EPO）酶免检测试剂盒应在2-8℃下运输，避免高温或阳光直射。样品的贮存和稳定性以及试剂的准备都在相关章节有介绍。微孔板可保存至有效期，不用的微孔板要立即放置密封袋内保存在2-8℃。

样品采集和贮存
血清
促红细胞生成素（EPO）酶免检测试剂盒需用人血清进行，样品双份检测。400ul血清是必要的，我们建议采样时间在7:3到12:00am，因为有文献报道称人的EPO是会不断变化的。无需加入抗凝剂采集全血，允许全血在2-8℃下凝结，报道称，与放免试验中在冰上凝集约30%相比，室温下凝集会导致EPO值降低。不要将样品放置在自动除霜冷冻机内，使用前，所有样品应平衡至室温，混合均匀，避免采用溶血或脂血样品
贮存条件：2-8℃，24h
-15℃，12个月
避免高温或是阳关直射，避免反复冻融


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