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- HZ-H321
- 2026年01月19日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
120
- 供应商：
沪震生物
- 品系：
细胞系
- 组织来源：
乳腺
- 相关疾病：
见说明书
- 物种来源：
人
- 免疫类型：
见说明书
- 细胞形态：
贴壁；上皮细胞样
- 是否是肿瘤细胞：
见说明书
- 器官来源：
乳腺
- 运输方式：
干冰运输or活细胞运输
- 年限：
1-52
- 生长状态：
贴壁；上皮细胞样
- 规格：
1000000细胞/株
组织来源：乳腺
培养条件：DMEM+10% FBS
形 态：贴壁；上皮细胞样
| 产品编号 | 名称 | 规格 | 价格 | 产品说明书 |
| HZ-H321 | BT-549；人乳腺管癌细胞 | 1×10^6 cells/瓶 | 询价 | 下载 |
BT-549细胞的冻存是细胞培养的基本操作，不同的实验室采用的方法略有差异，但是都会遵循慢冻速溶的宗旨。我认为有以下几点需要注意：
（1）冻存前细胞状态，细胞最好在对数生长期，细胞密度适合，刚刚发生细胞融合，过密或连成片的细胞状态不好，而且消化时不容易分散；
（2）冻存的密度不宜过低，10的6次方-7次方的数量级比较好，我冻存的细胞一般T25培养瓶（5*107），一瓶冻一管（1.5ml冻存管），10cm培养皿（大概10的8次方个细胞）分成两管。
（3）BT-549细胞消化和吹打，切忌胰酶消化过度，吹打不可太用力，最好不要吹出好多泡泡。消化后立即加入完全培养基吹打哦，不是加入冻存液再吹打。
（4）离心后加入冻存液。冻存液中FBS的用量对于肿瘤细胞株而言要求不是很严格，我从10%-90%都用过，问题不大，个人认为10%-20%可以了，能节约处就节约点嘛！另外，冻存液可以在处理细胞前配置，放在4度冰箱预冷。细胞离心后直接用预冷的冻存液重悬，移入冻存管。
（5）关于“慢冻”，传统的方法，BT-549细胞冻存管用棉花包好，4度2h，-20度2h或更长，-80度过夜，最后液氮。对于条件较好的实验室和细胞冻存数量多的实验室，推荐使用程序降温盒，内装异丙醇，在-80度并内可以逐渐降温，很方便，省了包棉花、4度、-20度了。
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文献和实验问： A549细胞到底是如何形态？我见过三角形，近乎MDCK细胞形态的，还有的呈长梭形。我感觉自己的细胞好像混进了MDCK细胞。大家帮忙诊断一下，谢谢。 我培养的A549细胞 答1：
我也在养A549细胞，也来讲讲自己的经验，希望大家共同学习。我们主要是看细胞的密度，大概有80-90%铺满培养瓶底就可以传代了，时间长短不一，大概有5-7天吧，一瓶一般传3-4瓶，中间一般会有一次换液的。培养基用的是1640+10%的小牛血清+200u/ml庆大霉素。传代时先倒掉就培养基，然后用PBS洗一两次，然后再用0.25%胰酶消化（100ml培养瓶盖住表面大概要两滴管左右），可镜经下观察细胞间已出现细胞胞质回缩变圆，缝隙变大（我的细胞大概要2min左右），即可倒去消化液，加入培养基，吹打细胞
我养了三种贴壁的细胞，用同样的消化方法，都很好。这三种细胞是A549，ECV304，2BS。1、0.25%胰酶新鲜解冻,不需要预热。2、倒掉培养瓶中的培养基,并用预冷的D-Hank‘s洗两次（要冷，用前4度中取出）。3、加入约1-2ml的胰酶,晃动瓶子,使液体浸润瓶底。4、超净台上放置约1-2分钟（2BS需要的时间更短，约1分钟）5、镜下观察（我一般都省略了，因为每次的效果都很好）,见细胞变圆或细胞间隙变大,即可加入含血清的培养基终止消化。（我们的胰酶都不去掉）6、从瓶口到瓶底吹打，可见细胞
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