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古朵生物
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100 U @ 5 U/μl
产品名称(单位)Hybridase™ Thermostable RNase H 100 U @ 5 U/μl
Epicentre ,EPICENTRE 公司,Epicentre 试剂,Epicentre 代理—试剂专业供应商【上海古朵生物】
Epicentre生物技术公司是一家核酸样品制备试剂以及酶的供给商,Epicentre位于美国威斯康星州麦迪逊的Epicentre生物技术公司成立于1987年,是分子生物学产品的制造商和销售商,其产品广泛应用于RNA扩增及基因表达分析,基于转座子的遗传分析,核酸纯化,DNA序列分析,PCR及RT-PCR扩增,DNA及RNA修饰酶,基因组克隆,体外转录,以及蛋白质研究和纯化等领域。另外,公司拥有广泛的分子生物学产品生产线,可为客户提供蛋白质定制服务。
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文献和实验RNase-free DNaseI (10 U/µl), 5 µl 0.1 M Tris-Cl pH 8.3, 5 µl 0.5 M KCl, 5 µl 15 mM MgCl 2 phenol extract once precipitate with 5 µl NaAcetate and 200 µl 100 % Ethanol incubate at least for 30 min at -80 °C spin, wash
)1.5 μL,LATaq DNA 聚合酶(5 U/μL)1.5 U,dd H2O 补足 25 μL。将首轮扩增产物以 TE 缓冲液(pH 8.0)稀释 10 倍作为 Nested PCR 的模板。扩增程序:94 ℃ 25 s,72 ℃ 4 min,7 个循环;94 ℃ 25 s,67 ℃ 4 min,32 个循环;67 ℃ 7 min,4 ℃ 保存。方法二 TAIL-PCR 技术1 基因组 DNA 提取(同上)2 TAIL-PCR 引物设计根据已知的基因组 DNA 片段序列,以待扩增的 5' 末端
的 ULTRAhyb-Oligo 缓冲液(17x 缓冲液)。使用前需在 68℃ 环境中进行溶解。 ( 7 ) 用 0.5 U T4 多核苷酸激酶(PNK,Roche) 和 6 μl [γ-32P ] ATP ( 5000 Ci/mmol ) 标记 1 μmol/L DNA 寡核苷酸(约含有 10 个与目的基因互补的 DNA 寡核苷酸)。 ( 8 ) 参照 Hamilton 和 Baulcombe 的方法,在 35°C 条件下进行 RNA 印迹杂交[14]。 3. 注释 注
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