大肠杆菌表达系统

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  • 2025年12月10日
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      大肠杆菌表达系统

    背景介绍

    大肠杆菌蛋白表达系统是最常用也是最经济实惠的蛋白表达系统。大肠杆菌蛋白表达系统主要有以下特点:遗传背景清楚;易于培养和控制;转化操作简单;表达水平高;成本低;周期短。

    安必奇技术团队有丰富的大肠杆菌系统蛋白表达经验。针对于有些外源基因在大肠杆菌中重组表达会形成膜包裹的高密度、不溶性蛋白质的包涵体的情况,我们会进行表达系统优化,尽量降低形成包涵体的几率。同时我们会通过评估确定适合的复性条件,进行温和的包涵体変复性。我们提供的复性蛋白纯度在95%以上。

    我们可以提供带有SUMO标签的特色融合蛋白的表达,对于客户要求切除标签的情况,我们可以做到切标签不留残基。我们具有特色的低温诱导表达体系,大大提高了蛋白可溶表达几率,增加了表达成功率和蛋白产物的活性概率。

    服务优势
    ·项目成功率超过95%。
    ·专业的蛋白表达技术团队
    ·一站式技术服务
    ·密码子优化:综合考虑到基因合成、载体构建、基因转录、mRNA翻译及修饰过程中的20多种因素。
    ·大规模制备和发酵:我们拥有10L、100L、500L和1000L的发酵罐,可在短时间内交付客户克级高纯度的目的蛋白。大肠杆菌表达系统服务基本流程

    1. 密码子优化
      涉及基因合成、载体构建、基因保证转录、mRNA翻译、翻译后修饰等环节。
    2. 载体构建和目的基因亚克隆。 安必奇有多种原核表达载体如pET-24(+),pETBlue,pGEX-6P-1和多种大肠杆菌表达宿主如BL21, Origami DE3等供挑选。
    3. 表达菌株的筛选及蛋白的小量诱导检测。
    4. 优化蛋白的表达方案并大量表达和纯化蛋白。
      拥有先进的AKTA purifier系统和预装的离子柱、分子筛、疏水柱及亲和层析柱。
    5. 蛋白折叠、修饰、复性以及内毒素检测和去除。
      安必奇提供多种蛋白的翻译后修饰和检测和蛋白质复性服务。
    6. 蛋白鉴定。
      利用定性或者定量分析的方法进行蛋白质鉴定。

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