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- 武汉华美生物工程有限公司的大肠杆菌表达平台可为您提供全方位的重组蛋白生产服务，在表达包括可溶性蛋白、包涵体、融合蛋白等方面，拥有丰富的经验和专业技术，能解决蛋白表达过程中的各种瓶颈问题。到目前为止，已为全球各地客户提供超过3000种蛋白。
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- 2025年07月15日
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- 服务名称：
大肠杆菌表达系统服务
- 提供商：
cusabio
拥有四大表达系统：
大肠杆菌表达系统：http://www.biomart.cn/infosupply/16376041.htm
酵母表达系统：http://www.biomart.cn/infosupply/16376047.htm
杆状病毒-昆虫细胞表达系统：http://www.biomart.cn/infosupply/16376049.htm
哺乳动物细胞表达系统：http://www.biomart.cn/infosupply/16376059.htm
更多产品请见公司主页：http://www.cusabio.cn/
详情请咨询：86-27-87582341 86-27-87196173
大肠杆菌表达系统是目前最常用，也是最经济实惠的蛋白表达系统，与其他表达系统相比具有遗传背景清楚，目的基因表达水平高，培养周期短，抗污染能力强等特点，是分子生物学研究和生物技术产业化发展进程中的重要工具。
武汉华美生物工程有限公司的大肠杆菌表达平台可为您提供全方位的重组蛋白生产服务，在表达包括可溶性蛋白、包涵体、融合蛋白等方面，拥有丰富的经验和专业技术，能解决蛋白表达过程中的各种瓶颈问题。到目前为止，已为全球各地客户提供超过3000种蛋白。
我们的优势：
- His、GST、MBP等标签多种表达方式同时进行，确保获得最优质的蛋白
- 保证蛋白为普通缓冲可溶
- 纯化的蛋白经过ELISA，Western-blot，或者其它生物活性验证。
- 可提供详细的表达纯化条件，实验数据以及菌株
| 实验项目 | 实验内容 | 交付结果 | 服务周期 |
| 1.质粒构建 | 包括IPTG,阿拉伯糖，热休克，冷休克诱导方式，GST，Trx，SUMO，BMP，His，HA，Flag，myc等融合标签载体的构建。 | 表达质粒 测序报告 | 1周 |
| 2.表达菌株筛选 | 将表达质粒转化到高效的E. coli表达菌株中。SDS-PAGE电泳检测，挑选合适的单克隆菌株用于目标蛋白的表达。 可提供表达菌株：DH5α, Top10, BL21 (DE3), BL21 (DE3) pLys, Golden, Rosetta(DE3), RosettaBlue(DE3),Rosetta gami B (DE3), C41等宿主。 |
表达菌株 SDS-PAGE图谱 | 3个工作日 |
| 3.目标蛋白表达及纯化、标签切除 | 摇瓶培养2-8L重组菌，诱导表达目标蛋白。 通过亲和层析，离子交换，疏水及凝胶过滤等多种层析方法纯化目的蛋白。可根据需求切除标签，再纯化获得目标蛋白 |
大于1mg目的蛋白，纯度最少90%以上 | 2~3周 |
| 4.包涵体复性 | 蛋白诱导表达与包涵体纯化 数百种缓冲条件快速筛选最佳复性缓冲，采用稀释复性，透析复性，柱层析复性等多种技术获得纯度大于90%的包涵体。 |
大于1mg目的蛋白 | 2~3周 |
| 300L高密度发酵，大规模纯化，冻干，对外服务，2014即将启动 | |||
服务实例
1、 GFP原核表达优化：GFP蛋白原核表达通常以包涵体形式表达，普通光源下，极难观察到绿色荧光。我公司通过对GFP序列进行突变，并对启动子进行筛选，优化培养条件，控制表达速率，用大肠杆菌表达的GFP蛋白，完全以可溶形式表达，自然光下可见强烈的绿色荧光。
2、复性条件筛选：采用96孔板阵列组合pH、盐浓度、氧化还原对、分子伴侣、表面活性剂等因素。将变性蛋白加入微孔板进行快速稀释复性，快速初筛几百种复性条件。
下图为GFP包涵体采用上述方法进行复性筛选
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武汉华美生物工程有限公司是国际领先的生物高新技术企业，专营基因、蛋白、抗体、Elisa试剂盒、诊断试剂原料、药物残留、食品安全小分子及其他小分子等高质量生物产品；并提供相关技术服务。
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文献和实验蛋白表达系统已经发展到了令人惊讶的顶峰时代。最近30年来，科学家们已经推动了基因工程、重组技术、纯化指南和性质鉴定等技术的急剧发展。其中包括驾驭病毒和细菌质粒的天然性质的能力，这些“carriers”将运载外源基因到宿主细胞中，然后被转化成蛋白。经过许多年的发展，蛋白生产能力的提高已经在进一步理解基因的功能和所编码蛋白的功用和相互作用等方面起到了积极作用，也将为寻找如单克隆抗体等治疗性蛋白打下基础。Paul Berg在他1980年的诺贝尔演讲中说：“毫无疑问，重组DNA技术的应用和发展
十分重要，因其不仅影响蛋白的表达，而且也影响随后的纯化过程。除耐受缓冲液条件有限外，当选择宿主表达系统时，His-tag 也有一些局限。 His-tag 大肠杆菌表达系统中较为有利，但实际情况下对于酵母，哺乳动物和昆虫细胞表达系统，尤其是分泌蛋白的纯化中，His-tag 系统则有局限。因为酵母和昆虫细胞的培养基 pH 通常为酸性，会干扰 His-标签蛋白与 IMAC 纯化树脂的结合。而酵母和哺乳动物细胞培养基，则通常含有氨基酸会竞争 His-标签的结合位点，如组氨酸，谷氨酰胺或精氨酸。 Strep
组分，也是一个关键的毒性因子，且与细菌生物膜合成、真核细胞感染、抗生素抗性和免疫调节息息相关。因此可作为一个潜在的药物靶点。 以下是从大肠杆菌中纯化非标签膜蛋白 0mpA 亚单位的流程。 图 2. 大肠杆菌中纯化非标签膜蛋白 0mpA 亚单位流程图 首先使用合适的去垢剂 C8E4，把 OmpA 膜蛋白溶解出来； 然后使用阴离子交换层析柱 RESOURCE Q 1 mL进行初步纯化，收集目标蛋白洗脱液； 浓缩后上样进行最后一步分子筛精纯，使用高分辨率层析柱 Superdex 200
