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- BC304-01
- 2025年07月14日
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- 保存条件：
-70度
- 保质期：
半年
- 英文名：
GV3101农杆菌感受态细胞
- 库存：
大量
- 供应商：
赛泓瑞
【GV3101农杆菌感受态细胞简单介绍】
【详细说明】
GV3101农杆菌感受态细胞产品介绍
GV3101菌株为农杆菌C58型背景，核基因中含有利福平抗性基因rif。此菌株还携带一种自身转运功能丧失的质粒（disarmed Ti plasmid）。GV3101菌株含有pMP90 (pTiC58DT-DNA)，该质粒含有vir基因（vir基因是TDNA插入植物基因组所必需的元件，pMP90 (pTiC58DT-DNA)质粒自身的T-DNA转移功能被破坏，但可辅助植物双元表达载体的T-DNA的转移）。pMP90 (pTiC58DT-DNA)质粒还含有Str和Gent抗性基因，赋予GV3101菌株链霉素和庆大霉素抗性。GV3101农杆菌适用于拟南芥、烟草、玉米、土豆等植物的转基因操作。GV3101 电转感受态特别适用于大质粒的转化，经pCAMBIA2301质粒检测转化效率大于10的5次方cfu/μg DNA。
GV3101农杆菌感受态细胞产品储存
操作方法:
1. 取100 μl冰上融化的GV3101农杆菌感受态细胞，加入目的DNA并用指尖轻轻拨打管底混匀(避免用枪吸打)，冰上静置25分钟。
2. 42℃水浴热激45秒，迅速放回冰上并静置2分钟，晃动会降低转化效率。
3. 向离心管中加入700μl不含抗生素的无菌培养基（2YT或LB），混匀后37℃，200 rpm复苏60分钟。
4. 5000rpm离心一分钟收菌，留取100μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YT或LB培养基上。
5. 将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。
GV3101农杆菌感受态细胞使用注意事项:
1. 感受态细胞最好在冰上融化。
2. 混入目的DNA时应轻柔操作。
3. 生长速度快 8-‐10小时可见克隆。
4.若用氨苄抗生素筛选，应使用含100 µg/ml ampicillin的平板。
GV3101农杆菌感受态细胞产品用于，仅供研究使用，不适用于人或动物体外治疗与诊断。
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