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40
- 英文名:
10×100μL
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海抚生
- 保存条件:
低温冷藏
- 规格:
10×100μL
1.CTAB 溶液在低于15℃时会析出沉淀,因此在将其加入冷冻的植物材料中之前必须预热。
2.在最适条件下,DNA—CTAB 沉淀呈白色纤维状,很容易一下子就从溶液中钩出。不过,某些植物种的DNA 沉淀中可能含有杂质,特别是多糖,使DNA 沉淀呈絮状或胶状,这种情况下可能需要稍事离心才能得到DNA. —CTAB 沉淀。
3.饱和酚虽然可有效地使蛋白质变性,但酚不能完全抑制RNA 酶的活性,而且酚可以溶解含poLy(A)的mRNA。如果用的混合液,可减轻这两种现象,同时可加入适量的作用是消泡,并使蛋白质层紧密,使水相和有机相分层较好。 细菌的培养和收集 将含有质粒pBS 的DH5α菌种接种在LB 固体培养基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培养12-24 小时。用无菌牙签挑取单菌落接种到5ml LB 液体培养基(含50μg/ml Amp)中,37℃振荡培养约12 小时至对数生长后期。小量提取法对于从大量转化子中制备少量部分纯化的质粒DNA 十分有用。这些方法共同特点是简便、快速,能同时处理大量试样,所得DNA 有一定纯度,可满足限制酶切割、电泳分析的需要。
LBA4404 农杆菌感受态细胞10×100μL费用详细介绍:

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LBA4404 农杆菌感受态细胞10×100μL费用3,5-二碘水杨酸锂(>98%,BC) 质量规格:美国进口 Choline Fenofibrate
3,5-二碘-L-酪氨酸 质量规格:美国进口 Probenecid Acyl β-D-Glucuronide
3,5-二碘-L-酪氨酸 质量规格:美国进口 Norfloxacin-d5
3,5-二碘-L-状腺素,3,5-二碘腺原氨酸 质量规格:美国进口 4-Oxo Norfloxacin
3,5-二苄氧基苄溴(>98.0%(GC)(T)) 质量规格:美国进口 N-Hydroxy Norfloxacin
3,5-二氨基-6-吡嗪-2-羧酸酯(标准品) 质量规格:美国进口 Norfloxacin-d8
3',5'-苄氧基酮(>97.0%(GC)) 质量规格:美国进口 Norfloxacin nicotinate
3,5-O-(1,1,3,3-四异基-1,3-二硅氧烷)腺苷 质量规格:美国进口 Cimetidine-d3
3,4-脱西洛他唑 质量规格:美国进口 N-Desmethyl Clozapine-d8
3,4-二氧基肉桂酸(标准品) 质量规格:美国进口 N-Desmethyl-d3 Zolmitriptan
LBA4404 农杆菌感受态细胞10×100μL费用操作流程:
1. 根据要保存的各样本的体积,计算出所需RNAwait用量。RNAwait的用量应当是组织体积的10倍(如100mg组织约用1ml RNAwait);离心收集2×106细胞RNAwait的用量是1ml。
2. 将RNAwait按需要量分装入自备保存管中;
3. 快速将较大的组织切成厚度<0.5 cm的任意片状,立即完全浸入RNAwait中。组织的厚度一定要<0.5 cm。组织过厚则RNAwait不能有效渗入,组织中间部位的RNA不能受到保护。较小的组织(如大鼠的肾脏、脾脏,小鼠的大部分器官)取下后可以直接浸入RNAwait。
4. 保存时先将样本浸入RNAwait后置4℃冰箱过夜(4℃过夜是必需的,这样可使RNAwait完全渗入到组织中),然后转移到-20℃冰箱(RNAwait在-20℃时仍为液态,有结晶析出,是正常情况);或者在4℃冰箱过夜后,从RNAwait中取出组织块,转移到-80℃冰箱。在RNAwait中保存的标本,反复冻融至室温20次不影响RNA的质量。
LBA4404 农杆菌感受态细胞10×100μL费用注意事项:
1. 组织和细胞取材速度要快,在获取后应当尽快浸入RNAwait,以防止RNA降解。
2. 冰冻组织不能用RNAwait保存,因为RNAwait不能有效渗入冰冻组织。
3. 保存样品的RNA提取:样本从-20℃或-80℃冰箱取出后,复苏到室温后,取出组织块,再用于提取RNA。细胞样本则复温后低速离心收集细胞,去除RNAwait,再用于提取RNA。后继的处理(如组织匀浆)可以在室温下进行,不必在液氮中操作,RNA仍能有效得到保护。残留少量RNAwait保存液不影响后继提取RNA的质量。
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文献和实验相关专题 DNA连接与转化 农杆菌感受态细胞的制备 1.挑取少许农杆菌LBA4404,接种于5ml LB液体培养基 (含50mg/L STR)中,28℃、200r/mim培养过夜。 2.取2ml培养物于LB液体培养基 (含50mg/L STR) 中继续培养,直至OD800 为0.5左右。 3.将培养物置冰浴中30min,4℃、5000r/min、离心5min,弃去上清液。 4.用10ml冷
,轻轻悬浮细胞,冰上放置20min。4℃5000rpm离心5min,去上清。 1.1.6. 加入4ml预冷的含15%甘油的0.1M的CaCl2溶液,轻轻悬浮。 1.1.7. 农杆菌悬浮液分装于无菌Eppendorf管中,每管200μl冻存于-70℃。 1.2. 双元载体转化农杆菌EHA105 取1μg左右的质粒DNA加入到200ml EHA105感受态细胞中,混匀后,冰浴30min,-70℃放置10min 。再在37℃水浴5min或42℃水浴1min,接着冰浴2min,加入800mlYM
情况下用大约 20~30 单位的酶大约 3 小时可以酶切完全。酶切后我们建议用琼脂糖凝胶回收线性化载体。将回收后的线性化载体定量,通常线性化载体的工作浓度为 50~100ng/μl。连接用水将退火后双链寡核苷酸 (10 μM) 稀释 100 倍备用。连接反应体系:T4 DNA 连接酶 5UEcoRV 5U线性化载体 2 μl稀释 100 倍后双链寡核苷酸 1 μl10× 连接酶 Buffer 1 μl50% PEG4000 1 μl加水补足 10 μl反应条件: 22℃ 30 min, 37℃ 15
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