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- 详细信息
- 文献和实验
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22
- 英文名:
详见说明书
- 保质期:
有效期一年
- 供应商:
上海莼试
- 保存条件:
-20℃避光保存
- 规格:
详见说明书
英文名称:
产品规格:100μl
发货周期:1~3天
本品是溶于DMSO的CCCP溶液,浓度为50mM,体积为100μl(相当于1mg的总量),常用作一种阳性对照来诱导细胞凋亡,并配合线粒体膜电位检测探针JC1(货号SY0488)或者JC10(货号SY0490)来进行相关研究。
CCCP,即Carbonyl cyanide 3chlorophenylhydrazone,一种质子载体(H+ ionophore),是一种强效的线粒体氧化磷酸化解偶联剂,促使线粒体内膜对H+产生通透性,导致线粒体内膜两侧的膜电位丧失,诱导凋亡发生。也可作用于叶绿体膜,抑制光合作用;CCCP还可抑制内质网高尔基体(ERGolgi)之间的蛋白转运,高亲和力结合细胞色素C氧化酶。
CCCP还具有其他功能:
1)在牛蛙交感神经方面的实验表明,CCCP 可增强促黄体生成素释放激素的释放;
2)作为一种质子导体在葡萄糖存在的情况下影响E.coli 细胞活性;
3)对细胞内钙水平的各种调节效应;
4)抑制脂肝酶的分泌;
5)部分抑制pH梯度活化的Cl摄取以及刷状缘膜的Cl/Cl交换等。
储存条件:20℃,有效期12个月
细胞生物学研究有以下几个方面。
细胞生物学的研究内容十分广泛,主要包括。
①细胞核、染色体以及基因表达的研究。
②生物膜与细胞器的研究。
③细胞骨架体系的研究。
④细胞增殖及其调控。
⑤细胞分化及其调控。
⑥细胞的衰老与编程性死亡(凋亡)。
⑦细胞的起源与进化。
⑧细胞工程。
注意事项:
CCCP(50mM) 细胞凋亡诱导剂尽管经测试Annexin V-FITC反复冻融5次对于其检测效果无显著影响,但为取得良好的使用效果,3-6个月内推荐4℃保存,并适当注意避免反复冻融。
如果有细菌或真菌污染,会严重影响检测效果。
染色后宜尽快检测,时间过长可能会导致凋亡或坏死细胞的数量增加。
如果细胞收集过程中使用了胰酶,需注意设法去除残留的胰酶。残留的胰酶会消化并降解Annexin V-FITC,导致染色失败。
荧光物质均易发生淬灭,在进行荧光观察时,尽量缩短观察时间,同时在操作和存放过程中也尽量注意避光保存。
用于流式细胞仪检测时,如果发现Annexin V-FITC单独染色时出现了过多的PI假阳性细胞,并且通过调整相关设置和参数也无法改善,可以用PBS将Annexin V-FITC稀释3-10倍后再进行检测,这样通常可以有效减少假阳性的坏死细胞。
需自备PBS。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
细胞培养的优点:
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。
以下是公司正在热销的产品:
Melamine/OVA(ovalbumin)CLDN1(Claudin 1)磷化γ连环蛋白抗体
NSEClaudin11 peptideJNK相互作用蛋白4抗体
Nogo66 140(NEP 140)CLDN1(Claudin 1)Cterm末端激酶1/2抗体
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依替米星200mg
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依达拉奉纯度标准物质8925899.6%,100mg
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伊曲康唑杂质G Itraconazole impurity G30mg/支,检查
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文献和实验和JC-1染色工作液,详见产品使用说明。稀释好的1× JC- 1 Assay Buffer保存在4°C。 2.阳性对照设置,详见产品使用说明;细胞按照实验方案进行凋亡诱导。 3.诱导完成后的细胞,300 g离心5 min,弃上清,收集细胞,PBS轻轻重悬细胞并计数。 注:良好的细胞状态是实验的关键。贴壁生长的细胞用于凋亡检测时,可能会因为胰酶消化、吹打等处理导致细胞的坏死或凋亡,对实验结果可能存在不可控的影响,请谨慎处理。 4.取1-5 × 105重悬的细胞,300 g离心5 min,弃上清
PMSF (强大的蛋白酶抑制剂),1 mM EDTA(变性剂和稳定剂),5 µg/ml Aprotinin(蛋白酶抑制剂),5 µg/ml Leupeptin(蛋白酶抑制剂),1% Triton x-100(破坏细胞),1% Sodium deoxycholate(中度变性剂和蛋白溶解剂),0.1% SDS(强变性剂和蛋白溶解剂)。14、裂解buffer:50mM HEPES pH7.0,1mM 甘油,1mM DTT(还原剂),7M 尿素,2M硫脲(可以提高膜蛋白的融解),1mM EDTA(金属鏊合剂
mM Tris-HCl pH 7.4(缓冲体系),150 mM NaCl(等渗体系),1 mM PMSF (强大的蛋白酶抑制剂),1 mM EDTA(变性剂和稳定剂),5 μg/ml Aprotinin(蛋白酶抑制剂),5 μg/ml Leupeptin(蛋白酶抑制剂),1% Triton x-100(破坏细胞),1% Sodium deoxycholate(中度变性剂和蛋白溶解剂),0.1% SDS(强变性剂和蛋白溶解剂)。14. 裂解buffer:50mM HEPES pH7.0,1mM
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