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- 2025年07月13日
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- 英文名：
AnnexinV Alexa Fluor647/PI
- 供应商：
索莱宝
- 保存条件：
2-8℃，避光保存，勿冰冻
- 规格：
20T/50T/100T
| 规格： | 20T | 产品价格： | ¥680.0 |
|---|---|---|---|
| 规格： | 50T | 产品价格： | ¥1560.0 |
| 规格： | 100T | 产品价格： | ¥2800.0 |
产品简介：
细胞凋亡早期改变发生在细胞膜表面，这些细胞膜表面的改变之一是磷脂酰丝氨酸（PS）从细胞膜内转移到细胞膜外，使 PS 暴露在细胞膜外表面。PS 是一种带负电荷的磷脂，正常主要存在于细胞膜的内面，在细胞发生凋亡时细胞膜上的这种磷脂分布的不对称性被破坏而使 PS 暴露在细胞膜外。Annexin V 具有易于结合到磷脂类如 PS 的特性，对 PS 有高度的亲和性。因此，该蛋白可充当一敏感的探针检测暴露在细胞膜表面的 PS。PS 转移到细胞膜外不是凋亡所独特的，也可发生在细胞坏死中。两种细胞死亡方式间的差别是在凋亡的初始阶段细胞膜是完好的，而细胞坏死在其早期阶段细胞膜的完整性就破坏了。因此，可以采用 AnnexinV 与PI 双染的方法，通过流式检测细胞早期凋亡。
操作步骤:
标记的 Annexin V 可结合流式细胞仪用于检测细胞外膜上的磷酯酰丝氨酸
1.用去离子水按 1:4 稀释结合缓冲液（4ml 结合缓冲液+12ml 去离子水）；
2.用 4℃预冷的 PBS 洗细胞两次，用 250ul 结合缓冲液重新悬浮细胞，调节其浓度为 1× 106/ml；
3.取 100µl 的细胞悬液于 5ml 流式管中，加入 5µl Annexin V/Alexa Fluor 647 和 10µl 20ug/ml的碘化丙锭溶液；
4. 混匀后于室温避光孵育 15 分钟；
5. 在反应管中加 400µl PBS，流式细胞仪（FACS）分析
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《The establishment of clonally derived chicken embryonic fibroblast cell line (CSC) with high transfection efficiency and ability as a feeder cell》 作者:Ruifeng Zhao , Jing Jin , Xinyu Sun , Kai Jin , Man Wang , Mahmoud F. Ahmed , Qisheng Zuo , Yani Zhang ,Zhenhua Zhao , Guohong Chen , Bichun Li 期刊:Journal of cellular Biochemistry 影响因子:3.062 PMID:30076744
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文献和实验binding buffer，加入2ulAnnexin-V-FITC(20ug/ml)，轻轻混匀，避光冰上放置15分钟。4、转至流式检测管，加入400ulPBS，每个样品临上机前加入1ulPI（50ug/ml），2分钟后迅速检测。5、同时以不加Annexin V-FITC 及PI 的一管作为阴性对照。三、注意事项1、整个操作动作要尽量轻柔，勿用力吹打细胞。2、操作时注意避光，反应完毕后尽快在一小时内检测四、结果判定以AnnexinV为横轴，PI为纵轴；左上象限为机械性损伤细胞；右上为晚期凋亡细胞或者坏死
：敏感度高，适合于检测少量样本，小部分凋亡细胞。如临床活组织检测。 Fasta921 zhaohu552211 wrote:感谢大家！我现在做的是大鼠的肝脏组织，不是细胞，在这种情况下我可以做AnnexV嘛？我知道AnnexV可以做细胞的，如果可以做组织的话，我定那家的试剂盒，具体要注意什么？ 听说这个电泳很难掌握条件！再次感谢大家！ 兄弟，貌似做AnnexinV国产很多不能做组织，呵呵！我没做过组织，没经验，提供点资料看看！美国ADL Annexin V-FITC & PI凋亡检测试剂盒
一、概述 在正常细胞中，磷脂酰丝氨酸只分布在细胞膜脂质双层的内侧，细胞发生凋亡最早期，膜磷脂酰丝氨酸（PS）由脂膜内侧翻向外侧，这一变化早于细胞皱缩、染色质浓缩、DNA片断化和细胞膜的通透性增加等凋亡现象。 AnnexinV是一种磷脂结合蛋白，与磷脂酰丝氨酸有高度亲和力，故可通过细胞外侧暴露的磷脂酰丝氨酸与凋亡早期细胞的胞膜结合。因此AnnexinV被作为检测细胞早期凋亡的灵敏指标之一。 碘化丙啶（Propidium Iodide,PI）是一种核酸染料，它不能透过完整的细胞
