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储存条件: Equilibration Buffer(平衡缓冲液)、rTdT 酶和 Proteinase K(蛋白酶 K)储存于 –20℃。Nucleotide Mix(核苷混合物)避光储存于 –20℃。这些组分要避免反复冻融。20X SSC 一旦解冻后在室温储存。本系统提供的蛋白酶 K 在使用前需用 1ml 的蛋白酶 K 缓冲液(见第 7 节)溶解。所得到的蛋白酶 K 溶液为 10mg/ml。将配好的蛋白酶 K 溶液分装成小份儿储存于 –20℃,在 –20℃该酶至少在六个月内是稳定的。
- 英文名:
DeadEnd™ Fluorometric TUNEL System
- 库存:
大量
- 规格:
60 reactions
说明:DeadEnd™ Fluorometric TUNEL System ( DeadEnd™ TUNEL 荧光法检测系统) 是一种传统的TUNEL 检测法,是为在某一细胞群体中对凋亡的细胞进行检测和定量而设计的。DeadEnd™ Fluorometric TUNEL 系统检测DNA 断裂,后者是很多细胞发生凋亡时的重要生物学信号。该检测系统无放射性,并且可以提供简单、快速、准确的方法在单细胞水平或细胞悬浮液中原位检测凋亡细胞。检测原理:DeadEnd™ Fluorometric TUNEL 系统检测断裂的DNA,在末端脱氧核苷转移酶(TdT) 的作用下,依靠催化荧光素-12-dUTP 掺入到DNA 的3' -OH 末端来检测凋亡细胞,根据TUNEL(TdT mediated dUTP Nick-End Labeling) 的原理,在DNA 末端形成一个多聚尾。荧光素-12-dUTP 标记的DNA 可以直接由荧光显微镜观测到或者流式细胞计数检测出。
特点
• 节约经费:该系统提供的试剂足够用于60 个体系为50μl 的反应。
• 节省时间:荧光标记的核苷的直接掺入减少了孵育步骤。
• 选择样品类型:可以在细胞培养物、以及经甲醛固定的、石蜡包埋的组织切片中检测凋亡的细胞。
• 方便:系统提供的塑料盖玻片简化了样品处理过程。
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文献和实验素检测系统是一个非放射检测系统,用于在含细胞凋亡和非细胞凋亡的细胞群体中,特异地、定量地检测细胞凋亡细胞。 3. 细胞凋亡荧光素检测系统的工作原理如何? 答:Promega公司的细胞凋亡荧光素检测系统依据TUNEL测试方法(TdT介导的dUTP缺口和末端标记)。它测量的是细胞核DNA降解成小片段,这一细胞凋亡的重要生化指标。用末端脱氧核苷转移酶(TdT)在细胞凋亡过程中,细胞形成的DNA小片段的3`-OH末端,催化加入荧光素-12-dUTP。荧光素-dUTP标记
and show the characteristic membrane blebbing (bubble formation)seen in cells dying via apoptosis.Promega公司的DeadEnd™比色法细胞凋亡检测系统能标记片断化的DNA,而这种片段化的DNA被视为是细胞凋亡的典型生化特征之一。DeadEnd™比色法细胞凋亡检测系统是一种在组织切片与培养细胞中标记凋亡细胞核的理想方法,与此同时,还可以做形态学上的评估。本文中,将展示此种方法在细胞凋亡的原位细胞, 动物模型及多种病理学组织切片中的应用。抗Fas
一、基本原理 某些物质的分子能吸收能量而发射出荧光,根据荧光的光谱和荧光强度,对物质进行定性或定量的方法,称为荧光分析法(fluorescence analysis)。 荧光分析法具有灵敏度高、选择性强、需样量少和方法简便等优点,它的测定下限通常比分光光度法低2~4个数量级,在生化分析中的应用较广泛 在室温下分子大都处在基态的最低振动能级,当受到光的照射时,便吸收与它的特征频率相一致的光线,其中某些电子由原来的基态能级跃迁到第一电子激发态或更高电子激发态中的各个不同振动











