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Merck
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大量
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FragEL™ DNA Fragmentation Detection Kit, Fluorescent
- 规格:
50 tests
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文献和实验的细胞几乎没有DNA的断裂,因而没有3'-OH形成,很少能够被染色。由此,TUNEL成为了检测DNA片段化(细胞凋亡)的最常用方法。(以TUNEL法细胞凋亡检测试剂盒(增强型,绿色荧光)为例) TUNEL检测:使用20 U/ml Dnase处理Hela细胞10分钟。 二、TUNEL实验中关键步骤 1. 充分脱蜡和水化。脱蜡前可先将切片在 60ºC烤片 20 min,再使用二甲苯脱蜡2次,每次 5-10 min;而水化一般建议用梯度乙醇从高浓度到低浓度浸洗,便于后期试剂能充分、均匀的结合反应
roy2929 小弟新手 实验等等都不怎么懂,希望高手们帮忙。 做TUNEL检测凋亡,除了本身没有发生凋亡和实验操作原因,还有什么可能会没有信号?比如通过其他不能用TUNEL检测到的方式发生了凋亡? 不胜感激 qwer_214 TUNEL是一种很特异的检测凋亡的方式,它主要检测DNA特异性的断裂,恕我资历比较浅,我到目前还没有发现其他用TUNEL检测到的方式发生了凋亡。 roy2929
用了许多方法检测小鼠的肝脏、脑部、睾丸等组织的细胞凋亡,其中 TUNEL 法做的最多,我购买的试剂盒主要是 roche、 promega 公司,结果大多数成功,偶尔也有失败,下面我把实验中的关键问题与大家共享一下,同时也希望能对初学者有所帮忙。 TUNEL 法的实验原理 基本原理:对不同组织切片先增加细胞膜通透性,然后让 rTDT 和生物标记的 dTUTP 进入细胞内,在 rTDT 的辅助下 dTUTP 与核断裂的 DNA 3』-OH 结合,再用 HRP 标记的链霉
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