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佰泰科
- 英文名:
Rabbit anti-normal human,serum
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1ml
中文名:兔抗-正常人血清
英文名:Rabbit anti-normal human,serum
储存条件:短期4℃长期-20℃
兔抗正常人免疫血清是将各种抗原分子分别以弗式完全佐剂(油包水溶性抗原分子)或弗氏不完全佐剂,及水剂相结合的剂型免疫注射于兔子的不同部位,产生高效价抗体后,经无菌低温分离制成。
应用:
兔抗正常人免疫血清可广泛的应用于医学、生物学的各个学科,特别在临床免疫测定和免疫病理的诊断中更是必备之材。
我们所提供的兔抗人IgG免疫血清从抗原纯化、动物免疫及效价测定,均为自行建立技术,所有抗血清工作效价用沉淀反应表示。
组化实验中对应抗原,或封闭对应杂抗体,测定对应抗原浓度,或抗原夹芯法测定对应抗体,吸收杂抗原成分,层析纯化抗原,分析与鉴定对应抗原成分。封闭交叉抗原,测定对应抗原成分,测定抗原的纯度等。
抗血清为含有某一类具有特异免疫功能的抗体分子的血清,一般为动物被人工注射某类抗原后制备的动物血清。高效价的抗血清用于研究工作以及疾病的诊断和治疗。
一种抗原能否引起抗体生成反应,一方面取决于抗原分子表面有无抗原决定簇(Antigenic determinant),另一方面取决于机体的免疫状态,当具备以上两个条件后,抗体生成将遵循抗体生成的一般规律——初次反应和再次反应。
抗原的种类繁多,包括天然的蛋白质抗原和细胞性抗原、合成性抗原以及基因工程抗原等,不同的抗原免疫动物具有不同的特殊性。一般完全抗原免疫动物需加用佐剂,尤其在使用可溶性抗原时,以期得到高效价的抗血清;合成性抗原和基因工程抗原等半抗原物质需先通过人工的方法与蛋白质载体连接后再与佐剂混合免疫动物,方可获得理想的免疫效果。
佐剂的条件作为一种良好的佐剂,必须具备下列条件:
(1) 增加抗原的表面积,并改变抗原的活性基团构型,从而增强抗原的免疫原性;
(2) 佐剂与抗原混合能延长抗原在局部组织的存留时间,减低抗原的分解速度,使抗原缓慢释放至淋巴系统中,持续刺激机体产生高滴度的抗体;
(3) 佐剂可以直接或间接激活免疫活性细胞并使之增生,从而增强了体液免疫、细胞免疫和非特异性免疫功能;
(4) 良好的佐剂应具有无毒性或副作用低的特点。
配制方法:按比例将羊毛脂与石蜡油置容器内,用超声波使之混匀,高压灭菌,置4℃下保存备用。
在免疫动物前,先将弗氏佐剂与抗原按一定比例混合,佐剂和抗原体积比一般为1:1,制备成 “油包水”乳状液。因为含SDS很易促使其乳化成油包水抗原乳化复合物,注射入动物体内时一定要保持乳化状态。抗原用量视抗原分子量不同及免疫原性及免疫动物不同而有一定差异,无统一标准和固定模式。一般是每兔(约2kg重)或每羊(约20kg重)第1次注射抗原1mg,以后逐次增加抗原量,最多每次不超过3mg.佐剂与抗原乳化可按如下方法进行:
(1) 研磨法:先将佐剂加热并取适量放入无菌的玻璃研钵内,待冷却后再缓缓滴入等体积的抗原溶液,边滴边按同一方向研磨,滴加抗原的速度要慢。待抗原全部加入后,继续研磨一段时间,使之成为乳白色粘稠的油包水乳剂。医学教育|网搜集整理本法适于制备大量的佐剂抗原,缺点是研钵壁上粘附大量乳剂,抗原损失较大。
(2) 注射器混合法:将等量的弗氏佐剂和抗原溶液分别吸入两个注射器内,两注射器之间以一细胶管相连,注意排净空气,然后交替推动针管,直至形成粘稠的乳剂为止。本法优点是容易做到无菌操作,抗原损失少,适用于制备少量的抗原乳剂。但同时难以乳化完全,个别抗原,用塑料注射器根本推不动,而用玻璃注射器又有渗漏。制备好的乳化剂经鉴定才能适用。鉴定方法是将乳化剂滴入冷水中,若保持完整不分散,成滴状浮于水面,即乳化完全,为合格的油包水剂。
(3) 超声:实验室条件好点的,比如说有超声破碎仪的,一定要控制超声频率和时间,超声容易激发一些自由基,对抗原有未知损害。乳化方法要根据抗原和需要而定。
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文献和实验相关专题 实验原理 凡能刺激机体产生抗体,并能与抗体发生特异性结合的物质称为抗原 。物质所具有的这种特性称为抗原性(Antigenicity)。当机体受抗原刺激后,在体液中出现的一种能与相应抗原发生反应的球蛋白,称免疫球蛋白(Immunoglobulin, Ig)。含有免疫球蛋白的血清称免疫血清。 医学上常见的抗原物质,种类很多,如病原微生物及其代谢产物(毒素),异种动物血清(各种抗毒素,免疫 血清
/单位,其稀释范围为1/10、1/20、1/40、1/80及1/160。 6.加样:将已稀释的不同浓度的工作标准蛋白依次用微量加样器每孔加入10ul(注意:每一稀释度均应更换塑料吸头)。 7.将加样的琼脂板放湿盒中,置37℃温箱,24小时后观察结果。 8.用量角规测量并记录沉淀环直径,然后以沉淀环直径为纵座标,以标准参考蛋白量(单位/ml)为横座标,绘制成标准曲线。(二)人血清中IgG正常值的测定: 1.将已制备好的抗体琼脂板置打孔模板上,每一琼脂板可打孔4个(孔径3mm,孔距10
记等测定法。 (一)环状沉淀反应 当抗原与相应抗体形成一个接触面时,如二者比例适当,接触面上可形成一个乳白色的环状物即为阳性沉淀反应。 材料: 1.免疫血清:免疫兔抗人血清 2.抗原:人血清 3.小沉淀管、毛细吸管、橡皮头、生理盐水。 方法: 1.取小沉淀管2只,以毛细吸管吸取抗人血清约0.2毫升,加入第一管,加时注意不能有气泡
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