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大量
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佰泰科
- 英文名:
Goat anti-CEA,serum
- 规格:
1ml
羊抗-CEA 血清,不含任何防腐剂,请避免微生物污染。用于免疫组化,免疫比浊法,ELISA等。对CEA双向扩散>1∶32
本品须避免反复冻融,-20℃存放。
抗血清为含有某一类具有特异免疫功能的抗体分子的血清,一般为动物被人工注射某类抗原后制备的动物血清。高效价的抗血清用于研究工作以及疾病的诊断和治疗。
一种抗原能否引起抗体生成反应,一方面取决于抗原分子表面有无抗原决定簇(Antigenic determinant),另一方面取决于机体的免疫状态,当具备以上两个条件后,抗体生成将遵循抗体生成的一般规律——初次反应和再次反应。
抗原的种类繁多,包括天然的蛋白质抗原和细胞性抗原、合成性抗原以及基因工程抗原等,不同的抗原免疫动物具有不同的特殊性。一般完全抗原免疫动物需加用佐剂,尤其在使用可溶性抗原时,以期得到高效价的抗血清;合成性抗原和基因工程抗原等半抗原物质需先通过人工的方法与蛋白质载体连接后再与佐剂混合免疫动物,方可获得理想的免疫效果。
佐剂的条件作为一种良好的佐剂,必须具备下列条件:
(1) 增加抗原的表面积,并改变抗原的活性基团构型,从而增强抗原的免疫原性;
(2) 佐剂与抗原混合能延长抗原在局部组织的存留时间,减低抗原的分解速度,使抗原缓慢释放至淋巴系统中,持续刺激机体产生高滴度的抗体;
(3) 佐剂可以直接或间接激活免疫活性细胞并使之增生,从而增强了体液免疫、细胞免疫和非特异性免疫功能;
(4) 良好的佐剂应具有无毒性或副作用低的特点。
配制方法:按比例将羊毛脂与石蜡油置容器内,用超声波使之混匀,高压灭菌,置4℃下保存备用。
在免疫动物前,先将弗氏佐剂与抗原按一定比例混合,佐剂和抗原体积比一般为1:1,制备成 “油包水”乳状液。因为含SDS很易促使其乳化成油包水抗原乳化复合物,注射入动物体内时一定要保持乳化状态。抗原用量视抗原分子量不同及免疫原性及免疫动物不同而有一定差异,无统一标准和固定模式。一般是每兔(约2kg重)或每羊(约20kg重)第1次注射抗原1mg,以后逐次增加抗原量,最多每次不超过3mg.佐剂与抗原乳化可按如下方法进行:
(1) 研磨法:先将佐剂加热并取适量放入无菌的玻璃研钵内,待冷却后再缓缓滴入等体积的抗原溶液,边滴边按同一方向研磨,滴加抗原的速度要慢。待抗原全部加入后,继续研磨一段时间,使之成为乳白色粘稠的油包水乳剂。医学教育|网搜集整理本法适于制备大量的佐剂抗原,缺点是研钵壁上粘附大量乳剂,抗原损失较大。
(2) 注射器混合法:将等量的弗氏佐剂和抗原溶液分别吸入两个注射器内,两注射器之间以一细胶管相连,注意排净空气,然后交替推动针管,直至形成粘稠的乳剂为止。本法优点是容易做到无菌操作,抗原损失少,适用于制备少量的抗原乳剂。但同时难以乳化完全,个别抗原,用塑料注射器根本推不动,而用玻璃注射器又有渗漏。制备好的乳化剂经鉴定才能适用。鉴定方法是将乳化剂滴入冷水中,若保持完整不分散,成滴状浮于水面,即乳化完全,为合格的油包水剂。
(3) 超声:实验室条件好点的,比如说有超声破碎仪的,一定要控制超声频率和时间,超声容易激发一些自由基,对抗原有未知损害。乳化方法要根据抗原和需要而定。
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文献和实验【摘 要】目的 建立利用液相芯片技术定量检测人血清中癌胚抗原(CEA)、甲胎蛋白(AFP)和神经原特异性烯醇化酶(NSE)的反应模式,并对该方法各项指标进行评价。方法 制备抗体交联微球及生物素标记抗体,用双抗夹心法检测临床血清标本。结果 同时检测CEA、AFP和NSE时的线性范围分别为0.078-200ng/ml、0.025-25U/ml、0.146.75ng/ml,最低检测限分别为39.1pg/ml、0.016U/ml、0.073ng/ml,分析内精密度〈10%,分析间精密度〈15%。检测
肿瘤标志物检测是临床上诊断胃癌的有效方式之一。 癌胚抗原 (CEA) 是临床上常用的肿瘤标志物之一,它属于糖蛋白,其相对分子量较大。健康人血液中 CEA 的含量极低,而恶性肿瘤患者血液中 CEA 的含量会明显升高。然而本例患者的 CEA 正常。 AFP 是一种由肝脏、卵黄囊和胃肠道产生和分泌的糖蛋白 [3],通常作为肝细胞癌 (HCC) 或卵黄囊肿瘤的重要肿瘤标志物。但在 HCC 和卵黄囊肿瘤以外的一些疾病中,血清 AFP 水平也较高,其中以胃癌最为常见 [4-5]。除了肝癌和胃癌,AFP 升高还可以见于睾丸
甲醇一滴在切片上,放置20min后再PBS冲洗3次,过蒸馏水后风干。 (2)加稀释好的兔抗CEA血清(稀释度根据染色工作效价)在37℃湿盒内放置45min。 (3)PBS清洗3次后风干,再加HRP标记物的羊抗兔IgG(稀释度也要根据染色工作效价),37 ℃ 湿盒内放置45min。 (4)PBS清洗3次后加新鲜配制的含3%H 2 O 2 pH7.6Tris缓冲
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