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北京百奥莱博专业生产供应组织/细胞基因组DNA/RNA快速共提取试剂盒,我公司销售全品类的分子生物学试剂,价格优惠,欢迎广大科研工作者垂询订购。
组织/细胞基因组DNA/RNA快速共提取试剂盒
规格:20次/50次
编号:YBP070
品牌:百奥莱博
产地:国产|进口
产品介绍:
独特的裂解液/β-巯基乙醇迅速裂解细胞和灭活细胞RNA酶, 基因组DNA在高离序盐条件下结合到吸附柱上, 未结合的总RNA在用乙醇调节结合条件后, 在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内玻璃纤维膜, 再通过一系列快速的漂洗-离心的步骤, 去蛋白液和漂洗液将细胞代谢物, 蛋白等杂质去除, 最后低盐的RNase free H20和洗脱缓冲液分别将纯净RNA和基因组DNA从玻璃纤维膜上洗脱。
产品特点:
• 离心吸附柱内玻璃纤维膜全部采用进口世界著名公司特制吸附膜, 柱与柱之间吸附量差异极小, 可重复性好, 克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。
• 不需要使用有毒的苯酚, 氯仿等试剂, 也不需要乙醇沉淀等步骤。
• 快速, 简捷, 单个样品操作一般可在45分钟内完成。
• 多次柱漂洗确保高纯度, OD260/OD280典型的比值达1.9~2.0,基本无DNA残留, 可用于RT-PCR, Northern-blot等各种实验。
适用范围:
适用于从同一个组织或细胞样品中同时快速提取基因组DNA和总RNA。
产品储存:
• 所有的溶液应该是澄清的, 如果环境温度低
时溶液可能出现沉淀, 此时不应该直接使用,可在37°C水浴加热几分钟, 即可恢复清。
• 运输和储存均在室温下(15°C-25°C)进行, 不当的储运温度(如4°C或者-20°C低温)会造成溶液沉淀, 影响使用效果。
• 避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、 氧化、 pH值变化, 各溶液使用后应及时旋紧盖
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·琼脂糖亲和介质(Ni)
编号:YBP173
规格:5ml/50ml/250ml/500ml
产品介绍:
琼脂糖亲和介质(谷胱甘肽)是专门设计用于分离纯化不同来源(如胎盘、肝脏、胞液、大片吸虫、昆虫、血吸虫、玉米螟等)的谷胱甘肽S-转移酶、谷胱甘肽S-转移酶的重组融合蛋白和依赖S-转移酶或谷胱甘肽的蛋白,一步分离即可得到高纯度的目标蛋白,操作条件温和,有利于保持蛋白活性。
肝素(Heparin)是一种含硫酸酯的酸性多糖,能和抗凝血因子III、凝血酶、类凝血酶、人凝血因子IX、XI和VIII,也能和大肠杆菌表达的人白介素、人前列腺生长因子、重组人血管内皮生长因子 、软骨生长因子、碱性成纤维细胞生长因子、重组人酸性成纤维细胞生长因子、重组肝细胞生长因子、重组鼠肝素辅因子II、重组人血小板第四因子、重组人内皮抑素、重组人角质细胞生长因子等生物大分子结合,所以肝素亲和介质可以用于这类物质的纯化。
琼脂糖亲和介质(Ni)属于一类金属螯合介质,它是将亚氨基二乙酸(IDA)键合在高流速琼脂糖微球上,并螯合金属离子Ni2+而形成的一种亲和层析介质。该亲和介质不仅具有吸附容量大、选择性好、通过性强、易于再生、成本低等优点,还有利于保持产品的生物活性和提高产品的收率,从而广泛用于生物制药和生物工程下游蛋白质、核酸及多肽的分离纯化,尤其是组氨酸标记蛋白质的高效制备。Protein A能特异性地与抗体的Fc区结合,所以Protein A亲和介质可用于抗体(单抗或多抗)的分离纯化,经过一步亲和层析,即可从腹水、血清和培养液等样品中得到高纯度的抗体。
产品储存:
谷胱甘肽琼脂糖凝胶在4-8°C下20%乙醇中保存;肝素琼脂糖凝胶在4-8°C下0.05M乙酸钠+20%乙醇中保存;镍琼脂糖凝胶在4-8°C下20%乙醇中保存;Protein A琼脂糖凝胶在4-8°C下20%乙醇中保存。
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·EASYspin植物超纯RNA快速提取试剂盒
编号:YBP001
规格:20次/50次/100次
本试剂盒在室温储存12个月不影响使用效果。
适用范围:
适用于从植物组织细胞中提取无基因组DNA污染的高纯度的总RNA。
储存事项:
1.所有的溶液应该是澄清的,如果环境温度低时溶液可能形成沉淀,此时不应该直接使用,可在37℃水浴加热几分钟,即可恢复澄清。
2.不合适的储存于低温(4℃或者-20℃)会造成溶液沉淀,影响使用效果,因此运输和储存均在室温下(15℃-25℃)进行。
3.避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、pH值变化,各溶液使用后应及时盖紧盖子。
产品介绍:
独特的裂解液RLTplus2迅速裂解细胞和灭活细胞RNA酶,植物RNA助提剂PLANTaid帮助结合多糖多酚并通过离心去除,基因组DNA在高离序盐条件下结合到基因组DNA清除柱上,未结合的总RNA然后用乙醇调节结合条件后,RNA在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内玻璃纤维膜,再通过一系列快速的漂洗-离心的步骤,去蛋白液和漂洗液将细胞代谢物,蛋白等杂质去除, 最后低盐的RNase free H20将纯净RNA从玻璃纤维膜上洗脱。
产品特点:
1.离心吸附柱内玻璃纤维膜全部采用进口世界著名公司特制吸附膜,柱与柱之间吸附量差异极小,可重复性好。克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。
2.不需要使用有毒的苯酚,氯仿等试剂,也不需要乙醇沉淀等步骤。
3.快速,简捷,单个样品操作一般可在45分钟内完成。
4.独有的植物RNA助提剂可以有效结合多糖多酚,提高清除效果。
5.基因组DNA清除柱可以有效的消除基因组DNA的污染。
6.多次柱漂洗确保高纯度,OD260/OD280典型的比值达1.9~2.0,基本无DNA残留,可用于RT-PCR,Northern-blot和各种实验。
注意事项
1.所有的离心步骤均在室温完成,使用转速可以达到12,000 rpm的传统台式离心机。
2.需要自备乙醇, β-巯基乙醇,一次性注射器(可选),研钵。
3.裂解液RLTplus2 和去蛋白液RW1中含有刺激性化合物,操作时要戴乳胶手套,避免沾染皮肤,眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时,要用大量清水或者生理盐水冲洗。
4.植物组织裂解是否充分直接影响到基因组DNA清除的效果和RNA 提取的质量和产量,本试剂盒中提供的裂解液RLTplus2,主要成分为异硫氰酸胍,适用于大多数植物组织的裂解,但有些植物组织(例如玉米的乳白色胚乳)或丝状真菌,由于次级代谢产物较特殊,异硫氰酸胍使样品产生固化,导致RNA 无法提取,此时可跟我们索取另一种裂解液。
操作步骤:(实验前请先阅读注意事项)
提示:
第一次使用前请先在漂洗液RW瓶中加入指定量无水乙醇!
操作前在裂解液RLTplus2中加入β-巯基乙醇至终浓度1%,如1 ml RLTplus2 中加入10μl β-巯基乙醇。此裂解液最好现用现配。配好的RLTplus2 4℃可放置一个月。
1.直接研磨法(推荐):
a.新鲜植物组织称重后取100mg迅速剪成小块放入研钵(冰冻保存或者液氮保存样品可直接称重后取100mg放入研钵),加入10体积(1ml)RLTplus2(请确定已加入β-巯基乙醇)和1体积(100μl) PLANTaid 室温下充分研磨成匀浆,注意应该迅速研磨让组织和裂解液RLTplus2立刻充分接触以抑制RNA酶活性。
b.将裂解物转入离心管,剧烈摇晃振荡15秒,12,000rpm离心5-10分钟,沉淀不能裂解的碎片和结合有多糖多酚的PLANTaid,将所有裂解物上清转移至一个基因组DNA清除柱中(清除柱放入收集管中),12,000rpm离心30~60秒,收集滤液。接下步骤3
2.液氮研磨法:
a.取500μl裂解液RLTplus2(已经加入β-巯基乙醇),转入1.5ml离心管中,加入50μl PLANTaid混匀备用。
b.液氮中研磨适量植物组织成细粉后,取50mg细粉转入上述装有RLTplus2和PLANTaid的离心管, 立即用手剧烈振荡20秒,充分裂解。
在56℃温育1-3分钟有助于裂解植物,但是淀粉含量高的植物不能温育,因为提高的温度可能导致淀粉膨胀。
c.用带钝针头的一次性 1 ml(配0.9mm针头) 注射器抽打裂解物 10 次或直到得到满意匀浆结果(或者电动匀浆30秒),可以剪切DNA,降低粘稠度和提高产量。
d.将裂解物12,000rpm离心5-10分钟,沉淀不能裂解的碎片和结合有多糖多酚的PLANTaid, 将所有裂解物上清转移至一个基因组DNA清除柱中(清除柱放入收集管中),12,000rpm离心30~60秒,收集滤液。接下步骤3
3.较精确估计所收集的滤液体积,加入0.5体积的无水乙醇,此时可能出现沉淀,但是不影响提取过程,立即吹打混匀,不要离心。将混合物(每次小于700μl,多可以分两次加入)加入一个吸附柱RA中,(吸附柱放入收集管中)12,000 rpm离心60秒,弃掉废液。
4.向吸附柱RA中加500μl 去蛋白液RW1,室温放置30秒,12,000rpm 离心30秒,弃掉废液。
5.向吸附柱RA中加入500μl漂洗液RW(请先检查是否已加入无水乙醇!),12,000 rpm 离心30秒,弃掉废液。加入500μl漂洗液RW,重复一遍。
6.将吸附柱RA放回空收集管中,12,000 rpm离心2分钟,尽量除去漂洗液, 以免漂洗液中残留乙醇抑制下游反应。
7.取出吸附柱RA,放入一个RNase free离心管中,根据预期RNA产量在吸附膜的中间部位加30-50μl RNase free water(事先在 70-90℃水浴中加热效果更好), 室温放置1分钟,12,000 rpm 离心1分钟。
8.如果预期RNA产量>30μg,加30-50μl RNase free water重复步骤7, 合并两次洗脱液,或者使用第一次的洗脱液加回到吸附柱重复步骤一遍(如果需要RNA浓度高)。
洗脱两遍的RNA洗脱液浓度高,分两次洗脱合并洗脱液的RNA产量比前者高15–30%,但是浓度要低,用户根据需要选择。
组织/细胞基因组DNA/RNA快速共提取试剂盒关键词:组织/细胞基因组DNA/RNA快速共提取试剂盒,YBP070,百奥莱博
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