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4℃
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一年
- 英文名:
Total RNA Extraction Reagent(Trizol Method)
- 库存:
806
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专业生产供应总RNA抽提试剂(Trizol法)哪里卖,我公司销售全品类的分子生物学试剂,价格优惠,欢迎广大科研工作者垂询订购。
名称:总RNA抽提试剂(Trizol法)哪里卖
英文名:Total RNA Extraction Reagent(Trizol Method)
编号:YT527
规格:100ml
产地:国产|进口
本试剂是一种用于动植物细胞或组织及细菌总RNA抽提的试剂。本产品采用和Invitrogen公司的TRIzol完全相似的原理和方法,抽提的方法和步骤完全相同。
本试剂的颜色和TRIzol相同,加入氯*(代"仿")后上层呈无色,下层呈紫红色,便于吸取上层水相。
本试剂可以抽提长达15 kb的RNA,也可以抽提microRNA等小RNA。抽提小RNA时宜-70℃沉淀过夜。抽提所得RNA无DNA和蛋白污染。一般所得RNA溶于DEPC水后的A260/280值为1.8-2.0。裂解细胞或和组织共匀浆时,可以保持样品中RNA的完整性,即可以有效抑制RNA的降解。
每一百万细胞用Trizol抽提可得5-15μg RNA;每毫克组织用Trizol抽提可得1-10μg RNA。产量因细胞和组织不同而异。每100ml本试剂可以抽提100个六孔板中的样品或100个50-80mg的组织样品。抽提两个样品约需一小时。抽提所得RNA可直接用于Northern,点杂交,纯化mRNA,体外翻译,RNase protection assay,cDNA克隆,以及RT-PCR;也可以用于基因表达芯片分析、高通量测序(deep sequencing)等对RNA质量要求较高的情况。
注意事项:
1. 需自备氯*(代"仿"),异丙醇,DEPC,75%乙醇(DEPC水配制),和DEPC水。DEPC(ST036),DEPC水(YT528)可向百奥莱博订购。
2. 所有离心管,枪头及相关溶液都必须无RNA酶污染。耐高温器物可150℃烘烤4小时以去除RNA酶,其它器物去除RNA酶可考虑用0.01%的DEPC水浸泡过夜,然后灭菌,烘干。溶液需用DEPC水配制。加0.01%(体积比) diethylpyrocarbonate(DEPC)至重蒸水或Milli-Q级水中,处理过夜,灭菌即成DEPC水。
3. 使用冻存的细胞或组织抽提总RNA的效果通常比新鲜的细胞或组织差一些。因为在细胞或组织冻融过程中一些细胞或组织内的RNase会被释放出来并剪切样品。如果不能及时抽提RNA,推荐先加入适量Trizol,并裂解样品后冻存。
4. 必须戴一次性手套操作,且尽量不要对着RNA样品呼气或说话,以防RNA酶污染。建议戴一次性口罩操作。
5. Trizol含有毒物质苯酚,避免接触皮肤或吸入。为防止溅入眼睛,请戴防护眼镜或使用透明保护屏。如皮肤接触Trizol,请立即用大量去垢剂和水冲洗,如仍有不适,请听取医生意见。
6. Trizol抽提总RNA的同时,理论上也可抽提蛋白和DNA,但未经测试。有兴趣者可按Invitrogen公司的TRIzol的操作步骤进行操作。
储存条件:4℃,有效期一年。
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·Fibrillarin抗体
编号:YT772
英文名称:anti-Fibrillarin antibody
规格:>20次
本抗体是用经过适当修饰的人工合成的人Fibrillarin Thr298附近一段多肽作为抗原制备而成的抗Fibrillarin兔单克隆抗体。本抗体如果用于常规的Western检测,至少可以检测20次。
本Fibrillarin抗体识别的是总Fibrillarin(total Fibrillarin),可以检测内源性的Fibrillarin。
Fibrillarin是一种2’-O-甲基转移酶,主要定位于核仁中,即RNA转录和pre-RNA加工区域。Fibrillarin与几种结构蛋白、box C/D snoRNA形成复合物,在pre-rRNA加工和甲基化、核糖体组装(ribosome assembly)过程中发挥重要作用。该复合物可以催化rRNA序列特异的2’-O-ribose甲基化。Fibrillarin的序列、结构和功能高度保守,Fibrillarin的基因表达对早期胚胎发育有重要作用,基因敲除会出现胚胎致死。酵母中的fibrillarin的同源蛋白为Nop1p,也定位在核仁中,和18S rRNA的加工成熟有关。自身免疫疾病硬皮病患者的血清中通常含有较高水平的fibrillarin抗体。Fibrillarin被广泛用作核仁定位的标记蛋白(protein marker for nucleoli)。
产品组份:
Fibrillarin抗体————20μl
Western一抗稀释液————20ml
免疫原物种:人
免疫原:人工合成的人Fibrillarin Thr298附近一段多肽
克隆性:单克隆抗体
宿主:兔
用途:WB,IF-IC
交叉反应性:人,小鼠,大鼠,猴
同种型:IgG
Fibrillarin分子量:~37kD
推荐稀释比例:WB(1:1000),IF-IC(1:400)
注意事项:
1. 在Western实验后,请注意回收稀释的抗体。回收的抗体在进行Western实验时至少可以重复使用10次。稀释后的抗体,包括已经使用过的稀释抗体,4℃保存。
2. 回收后重复使用的抗体,使用方法同新鲜稀释的抗体。如果在重复使用过程中发现抗体出现轻微混浊现象,可以10000g离心1-3分钟,取上清用于后续检测。如果回收的抗体出现明显的絮状物或长霉长菌等情况,则可以考虑废弃该抗体。
3. 对于本抗体,Western检测时一抗要4℃缓慢摇动过夜,如果仅短时间与一抗孵育检测效果较差。
储存条件:-20℃,有效期一年。
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文献和实验RNA 的 trizol,好像贵一些。 2. 关于配套试剂: Trizol 法提取 RNA 是要用到氯仿、异丙醇和乙醇的。氯仿现在是违禁品,不大好买(我们学校试剂科现在不卖),所以买的时候要让试剂上给送,一般他们都能免费给送。氯仿遇光易分解,试剂商给你的时候应该是遮光的。异丙醇虽然没有特殊说明,但我查的据说也是最好避光保存,不过这种试剂都是棕色瓶子,能遮蔽大部分的光线了。 3. 关于实验时的防护: RNA 很容易降解,所以实验时一般都要求口罩帽子的,避免组织的污染。不过以我的经验
RNA抽提指南(TRIZOL法) 注意事项: * 全程佩戴一次性手套。皮肤经常带有细菌和霉菌,可能污染RNA的抽提并成为RNA酶的来源。培养良好的微生物实验操作习惯预防微生物污染。 * 使用灭菌的,一次性的塑料器皿和自动吸管抽提RNA,避免使用公共仪器所导致的RNA酶交叉污染。例如,使用RNA探针的实验室可能用RNA酶A 或T1来降低滤纸上的背景,因而某些非一次性的物品(如自动吸管)可能富含RNA酶。 * 在TRIZOL 中,RNA 是隔离在RNA 酶污染之外的。而对样品
自己整理的protocol,希望对大家有所帮助! Preparations: 1. 高压2遍的物品及试剂:Ep管[大、中、小] 移液枪头[大、中、小] 0.1%DEPC[sigma]水—v/v, 室温静置过夜-高压2遍(大Ep管分装 后冻与-20℃) 2. 试剂:Trizol[invitrogen](4度) 100%无水乙醇(生产日期近,越久的挥发越多;及时盖盖) 氯仿(三氯甲烷CH3Cl3) 异丙醇 3. 其它:手套【需要勤换-防止RNA酶降解RNA】;口罩;冰盒
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