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- Thermo scientific -fermentas
- ER1301
- 2025年10月09日
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|
| Catalog# | Size, concentration | Supplied with: | Certificate of Analysis | MSDS | |
| 10X Buffer R | 10X Buffer Tango™ | ||||
| ER1301 | 1000 u (10 u/µl) | 1.00 ml | 1.00 ml | ER1301 | |
| Recommended buffer for 100% activity | Optimal temperature | Enzyme activity in Fermentas buffers, % | Tango™ buffer for double digestion | |||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| B (blue) 1X |
G (green) 1X |
O (orange) 1X |
R (red) 1X |
Tango™ (yellow) 1X / 2X |
||||
| R | 37°C | 0-20 | 20-50 | 50-100 | 100 | 20-50 | 50-100 | 1X or 2X |
Lambda DNA
0.7%琼脂糖
9 切割位点
10 mM Tris-HCl (pH 8.5, 37°C), 10 mM MgCl2 , 100 mM KCl, 0.1 mg/ml BSA。
37°C酶切。
10 mM Tris-HCl (pH 7.4, 25°C), 100 mM KCl, 1 mM DTT, 1 mM EDTA, 0.2 mg/ml BSA和50% (v/v)甘油。
Dcm: 可能重叠 – 不影响。
CpG: 无重叠 – 不影响。
EcoKI: 无重叠 – 不影响。
EcoBI: 可能重叠 – 影响不确定。
| Methylation type | Sequence | Cleavage effect |
|---|---|---|
| Dcm (CCWGG) | 5'...Cm5CT GG (N)3 AGG...3' |
不阻止酶切 |
| Dcm (CCWGG) | 5'...Cm5CT GG NCm5CA GG ...3' |
不阻止酶切 |
| bp from the recognition site to fragment end | ||||
|---|---|---|---|---|
| 1 | 2 | 3 | 4 | 5 |
| 20-50 | 50-100 | |||
| Lambda | ΦX174 | M13mp18/19 | pBR322 | puc18/19 | pUC57 |
|---|---|---|---|---|---|
| 9 | 0 | 0 | 1 | 0 | 0 |
| pTZ19R/U | pTZ57R | pBluescriptIIKS(-/+) | pBluescriptIISK(-/+) | pACYC177 | pACYC184 |
| 0 | 0 | 0 | 0 | 1 | 1 |
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文献和实验Cleavage Efficiency Close to the&nbs
I 0 50-100 VspI 50-100 XagI 20-50 50-100 XapI 20-50 50-100
Cleavage Efficiency Close to the Termini of PCR Fragments
I 0 50-100 VspI 50-100 XagI 20-50 50-100 XapI 20-50 50-100
Raf 蛋白 Ras 结合结构域的简并进化库合成以及利用片段互补法快速筛选二氢叶酸还原酶的快速折叠且稳定的克隆
) 或碱裂解的质粒大量提取。 ( 8 ) 限制性内切核酸酶：Hpal、XmaI、EcoNI 和 XbaI ( NEB 或 Fermentas)。 ( 9 ) XL-1 Blue 感受态细胞（chemiocompetent cell ) ( 见 15.2.8)。 2.4 克隆竞争实验 ( 1 ) 玻璃培养皿或 15 ml 锥形管（Coming )。 ( 2 ) 固体和液体选择培养基 [ 与 15.2.3 ( 6 ) 相同，除液体培养基中不加琼脂
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