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FastDigest® Eco31I

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  • Thermo scientific -fermentas
  • FD0293
  • 2025年09月25日
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    • - 推荐的缓冲液 : FastDigest®缓冲液
    • - 孵育温度37°C
    • - 连接效率95%
    • - Dcm甲基化重叠可能影响DNA切割
    • - CpG甲基化重叠可能影响DNA切割
    • - 热失活65°C, 5 min
    • - 重组酶
    • - LO合格
    Catalog# Size, concentration Supplied with: Certificate of Analysis MSDS
    10X FastDigest® Buffer 10X FastDigest® Green Buffer
    FD0293 50 µl (50 react.) 1.00 ml 1.00 ml FD0293
    FD0294 100 µl (100 react.) 1.00 ml 1.00 ml FD0294
    Reaction conditions
    Reaction temperature Digestion time with 1µl of FastDigest® enzyme, min bp from end of DNA required for complete digestion Thermal inactivation Incubation time without star activity, hours
    Lambda, 1µg/20µl Plasmid DNA, 1µg/20µl PCR product, ~0.2µg/30µl Genomic DNA, 1µg/10µl
    37°C 5 5 5 5 3 65°C, 5 min 16

    Lambda DNA (dcm- )
    0.7%琼脂糖
    2 切割位点

    配方
    1 µl (1 FDU)是指在37°C,1X FastDigest® 缓冲液中5分钟内酶切1 µg lambda DNA dcm /HindIII片段所需的酶量。

    推荐反应条件
    1X FastDigest®缓冲液或 1X FastDigest® Green 缓冲液,37°C。
    1 µl FastDigest® Eco31I可在
    – 5分钟内酶切1 µg lambda DNA dcm- /HindIII片段;
    – 5分钟内酶切1 µg质粒DNA;
    – 5分钟内酶切0.2 µg PCR扩增产物;
    – 5分钟内酶切1 µg基因组DNA或30分钟内酶切5 µg基因组DNA。

    商业化同裂酶
    采用REsearch™软件寻找同功酶。

    甲基化影响
    Dam: 无重叠 – 不影响。
    Dcm: 可能重叠 – 部分影响。
    CpG: 可能重叠 – 部分影响。
    EcoKI: 无重叠 – 不影响。
    EcoBI: 可能重叠 – 影响不确定。

    Methylation type Sequence Cleavage effect
    Dcm (CCWGG)

    5'...Cm5CW GG TCTC...3'
    3'...G GWm5CC AGAG...5'

    部分影响
    CpG

    5'...GGTCTm5C G ...3'
    3'...CCAGA Gm5C ...5'

    不阻止酶切
    CpG

    5'...m5C G GTCTC...3'
    3'... Gm5C CAGAG...5'

    部分影响
    Number of recognition sites in DNA molecules
    Lambda ΦX174 M13mp18/19 pBR322 puc18/19 pUC57
    2 0 0 1 1 1
    pTZ19R/U pTZ57R pBluescriptIIKS(-/+) pBluescriptIISK(-/+) pACYC177 pACYC184
    1 1 1 1 1 0

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