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- Thermo scientific -fermentas
- FD0454
- 2025年09月23日
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|
| Catalog# | Size, concentration | Supplied with: | Certificate of Analysis | MSDS | |
| 10X FastDigest® Buffer | 10X FastDigest® Green Buffer | ||||
| FD0454 | 20 µl (20 react.) | 1.00 ml | 1.00 ml | FD0454 | |
Reaction conditions
| Reaction temperature | Digestion time with 1µl of FastDigest® enzyme, min | bp from end of DNA required for complete digestion | Thermal inactivation | Incubation time without star activity, hours | |||
|---|---|---|---|---|---|---|---|
| Lambda, 1µg/20µl | Plasmid DNA, 1µg/20µl | PCR product, ~0.2µg/30µl | Genomic DNA, 1µg/10µl | ||||
| 37°C | 5 | 5 | 5 | 5 | 1 | 65°C, 10 min | 6 |
Lambda DNA
1.0%琼脂糖
14 切割位点
配方
1 µl (1 FDU)是指在37°C，1X FastDigest® 缓冲液中5分钟内酶切1 µg lambda DNA所需的酶量。
推荐反应条件
1X FastDigest®缓冲液或 1X FastDigest® Green 缓冲液 + 1 mM DTT , 37°C。
1 µl FastDigest® BsmBI (Esp3I)可在
– 5分钟内酶切1 µg lambda DNA;
– 5分钟内酶切1 µg质粒DNA;
– 5分钟内酶切0.2 µg PCR扩增产物;
– 5分钟内酶切1 µg基因组DNA或30分钟内酶切5 µg基因组DNA。
1 µl FastDigest® BsmBI (Esp3I)可在
– 5分钟内酶切1 µg lambda DNA;
– 5分钟内酶切1 µg质粒DNA;
– 5分钟内酶切0.2 µg PCR扩增产物;
– 5分钟内酶切1 µg基因组DNA或30分钟内酶切5 µg基因组DNA。
备注
酶切需要添加DTT (#R0861/2)，DTT需新鲜配制。
商业化同裂酶
采用REsearch™软件寻找同功酶。
甲基化影响
Dam: 无重叠 – 不影响。
Dcm: 无重叠 – 不影响。
CpG: 可能重叠 – 阻止酶切。
EcoKI: 可能重叠 – 不影响。
EcoBI: 可能重叠 – 影响不确定。
Dcm: 无重叠 – 不影响。
CpG: 可能重叠 – 阻止酶切。
EcoKI: 可能重叠 – 不影响。
EcoBI: 可能重叠 – 影响不确定。
| Lambda | ΦX174 | M13mp18/19 | pBR322 | puc18/19 | pUC57 |
|---|---|---|---|---|---|
| 14 | 0 | 1 | 1 | 2 | 2 |
| pTZ19R/U | pTZ57R | pBluescriptIIKS(-/+) | pBluescriptIISK(-/+) | pACYC177 | pACYC184 |
| 0 | 0 | 0 | 0 | 1 | 2 |
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