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- Thermo scientific -fermentas
- FD1464
- 2025年09月19日
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|
| Catalog# | Size, concentration | Supplied with: | Certificate of Analysis | MSDS | |
| 10X FastDigest® Buffer | 10X FastDigest® Green Buffer | ||||
| FD1464 | 20 µl (20 react.) | 1.00 ml | 1.00 ml | FD1464 | |
Reaction conditions
| Reaction temperature | Digestion time with 1µl of FastDigest® enzyme, min | bp from end of DNA required for complete digestion | Thermal inactivation | Incubation time without star activity, hours | |||
|---|---|---|---|---|---|---|---|
| Lambda, 1µg/20µl | Plasmid DNA, 1µg/20µl | PCR product, ~0.2µg/30µl | Genomic DNA, 1µg/10µl | ||||
| 37°C | 5 | 5 | 5 | 5 | 3 | 80°C, 5 min | 16 |
Lambda DNA
0.7%琼脂糖
13 切割位点
配方
1 µl (1 FDU)是指在37°C，1X FastDigest® 缓冲液中5分钟内酶切1 µg lambda DNA所需的酶量。
推荐反应条件
1X FastDigest®缓冲液或 1X FastDigest® Green 缓冲液，37°C。
1 µl FastDigest® AgeI (BshTI)可在
– 5分钟内酶切1 µg lambda DNA;
– 5分钟内酶切1 µg质粒DNA;
– 5分钟内酶切0.2 µg PCR扩增产物;
– 5分钟内酶切1 µg基因组DNA或30分钟内酶切5 µg基因组DNA。
1 µl FastDigest® AgeI (BshTI)可在
– 5分钟内酶切1 µg lambda DNA;
– 5分钟内酶切1 µg质粒DNA;
– 5分钟内酶切0.2 µg PCR扩增产物;
– 5分钟内酶切1 µg基因组DNA或30分钟内酶切5 µg基因组DNA。
商业化同裂酶
采用REsearch™软件寻找同功酶。
兼容性末端
FastDigest® AvaI (Eco88I), FastDigest® BsrFI (Cfr10I), FastDigest® Kpn2I, FastDigest® MreI, AvaI (C^CCGGG), BsrFI, Cfr10I, Kpn2I, Cfr9I, Eco88I (C^CCGGG), BsaWI, MreI, SgrAI。
甲基化影响
Dam: 无重叠 – 不影响。
Dcm: 无重叠 – 不影响。
CpG: 完全重叠 – 阻止酶切。
EcoKI: 可能重叠 – 影响不确定。
EcoBI: 可能重叠 – 影响不确定。
Dcm: 无重叠 – 不影响。
CpG: 完全重叠 – 阻止酶切。
EcoKI: 可能重叠 – 影响不确定。
EcoBI: 可能重叠 – 影响不确定。
| Methylation type | Sequence | Cleavage effect |
|---|---|---|
| CpG | ACCGGT |
阻止酶切 |
| Lambda | ΦX174 | M13mp18/19 | pBR322 | puc18/19 | pUC57 |
|---|---|---|---|---|---|
| 13 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 |
| pTZ19R/U | pTZ57R | pBluescriptIIKS(-/+) | pBluescriptIISK(-/+) | pACYC177 | pACYC184 |
| 0 | 0 | 0 | 0 | 2 | 4 |
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文献和实验相关实验
used for PCR in this protocol. 4. Cloning enzymes: FastDigest Bbs I, FastDigest Age I, FastAP(Thermo Scientifi c/Fermentas, Pittsburg, PA, USA), Plasmid-Safe exonuclease (Epicentre, Madison, WI, USA), T7 DNA ligase. 5. 10× T4 DNA ligase buffer
技术资料暂无技术资料 索取技术资料
FastDigest® AgeI (BshTI)
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