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- Thermo scientific -fermentas
- ER0051
- 2025年11月06日
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| Catalog# | Size, concentration | Supplied with: | Certificate of Analysis | MSDS | |
| 10X Buffer BamHI | 10X Buffer Tango™ | ||||
| ER0051 | 4000 u (10 u/µl) | 2 x 1.00 ml | 1.00 ml | ER0051 | |
| ER0052 | 5 x 4000 u (10 u/µl) | 4 x 1.00 ml | 1.00 ml | ER0052 | |
| ER0053 | 20000 u (50 u/µl) | 4 x 1.00 ml | 1.00 ml | ER0053 | |
| ER0055 | 10000 u (10 u/µl) | 4 x 1.00 ml | 1.00 ml | ER0055 | |
| ER0057 | 2000 u (10 u/µl) | 2 x 1.00 ml | 1.00 ml | ER0057 | |
| Recommended buffer for 100% activity | Optimal temperature | Enzyme activity in Fermentas buffers, % | Tango™ buffer for double digestion | |||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| B (blue) 1X |
G (green) 1X |
O (orange) 1X |
R (red) 1X |
Tango™ (yellow) 1X / 2X |
||||
| BamHI | 37°C | 20-50* | 100 | 20-50 | 50-100* | 100* | 50-100 | 1X* or 2X |
Lambda DNA
0.7%琼脂糖
5 切割位点
10 mM Tris-HCl (pH 8.0, 37°C), 5 mM MgCl2 , 100 mM KCl, 0.02% Triton X-100, 0.1 mg/ml BSA。
37°C酶切。
10 mM Tris-HCl (pH 7.4, 25°C), 200 mM NaCl, 1 mM DTT, 0.1 mM EDTA, 0.15% Triton X-100, 0.2 mg/ml BSA和50% (v/v)甘油。
备注
Dcm: 可能重叠 – 不影响。
CpG: 可能重叠 – 不影响。
EcoKI: 无重叠 – 不影响。
EcoBI: 无重叠 – 不影响。
| Methylation type | Sequence | Cleavage effect |
|---|---|---|
| Dam (GATC) | GGm6ATC C |
不阻止酶切 |
| Dcm (CCWGG) | 5'...Cm5CW GG ATCm5CW GG ...3' |
不阻止酶切 |
| CpG | 5'...m5C G GATCm5C G ...3' |
不阻止酶切 |
| bp from the recognition site to fragment end | ||||
|---|---|---|---|---|
| 1 | 2 | 3 | 4 | 5 |
| 50-100 | ||||
| Lambda | ΦX174 | M13mp18/19 | pBR322 | puc18/19 | pUC57 |
|---|---|---|---|---|---|
| 5 | 0 | 1 | 1 | 1 | 1 |
| pTZ19R/U | pTZ57R | pBluescriptIIKS(-/+) | pBluescriptIISK(-/+) | pACYC177 | pACYC184 |
| 1 | 1 | 1 | 1 | 1 | 1 |
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文献和实验相关专题 重组DNA技术工具酶 限制性核酸内切酶产品选择专题 实验目的 1. 学会DNA限制性内切酶 酶切技术。 2. 琼脂 糖凝胶电泳法观察酶切DNA的结果。 实验原理 质粒pUC118上有限制性内切酶BamHI的识别序列G↓GATCC，用BamHI酶切后形成线性质粒DNA。琼脂 糖凝胶电泳可以按酶切产物分子量的大小分离DNA片段，小片段比大片段迁移快，凝胶上迁移的距离
Methylation analyis using restriction enzyme digestion
. Therefore first of all define the region of interest flanked with restriction sites for CG methylation insensitive enzymes (BamHI for example), and containing not more than 5-6 sites for HpaII. The probe used for Southern blot hybridisation should be located within this region
cindyly267 最近在构建一个克隆，两个多月了都还没成功。具体情况如下：使用的是promega公司的Halotag载体，约3900kb。片段约500kb。酶切位点是SgfI 和 BamHI。之前用别人连了片段的载体酶切后再做载体的，无论怎么切都是自连。这次使用了公司的原始载体（带致死基因），片段也是从T载上切下来的，所以感觉载体和片段都切的没问题了，结果一个都没长（可能有自连的但是死了）。 引物，酶切位点什么的都检查过了没问题，实在是没
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