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- Thermo scientific -fermentas
- ER0051
- 2025年11月06日
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|
| Catalog# | Size, concentration | Supplied with: | Certificate of Analysis | MSDS | |
| 10X Buffer BamHI | 10X Buffer Tango™ | ||||
| ER0051 | 4000 u (10 u/µl) | 2 x 1.00 ml | 1.00 ml | ER0051 | |
| ER0052 | 5 x 4000 u (10 u/µl) | 4 x 1.00 ml | 1.00 ml | ER0052 | |
| ER0053 | 20000 u (50 u/µl) | 4 x 1.00 ml | 1.00 ml | ER0053 | |
| ER0055 | 10000 u (10 u/µl) | 4 x 1.00 ml | 1.00 ml | ER0055 | |
| ER0057 | 2000 u (10 u/µl) | 2 x 1.00 ml | 1.00 ml | ER0057 | |
Reaction conditions
| Recommended buffer for 100% activity | Optimal temperature | Enzyme activity in Fermentas buffers, % | Tango™ buffer for double digestion | |||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| B (blue) 1X |
G (green) 1X |
O (orange) 1X |
R (red) 1X |
Tango™ (yellow) 1X / 2X |
||||
| BamHI | 37°C | 20-50* | 100 | 20-50 | 50-100* | 100* | 50-100 | 1X* or 2X |
* –星活性比5倍过量酶切(5 units x 1 hour)还强。
Lambda DNA
0.7%琼脂糖
5 切割位点
100%酶活性的反应条件
1X 缓冲液BamHI：
10 mM Tris-HCl (pH 8.0, 37°C), 5 mM MgCl2 , 100 mM KCl, 0.02% Triton X-100, 0.1 mg/ml BSA。
37°C酶切。
10 mM Tris-HCl (pH 8.0, 37°C), 5 mM MgCl2 , 100 mM KCl, 0.02% Triton X-100, 0.1 mg/ml BSA。
37°C酶切。
保存缓冲液
BamHI保存在：
10 mM Tris-HCl (pH 7.4, 25°C), 200 mM NaCl, 1 mM DTT, 0.1 mM EDTA, 0.15% Triton X-100, 0.2 mg/ml BSA和50% (v/v)甘油。
10 mM Tris-HCl (pH 7.4, 25°C), 200 mM NaCl, 1 mM DTT, 0.1 mM EDTA, 0.15% Triton X-100, 0.2 mg/ml BSA和50% (v/v)甘油。
连接和重新酶切
50倍BamHI过量酶切后，超过95%的酶切产物可以连接和重新酶切。
琼脂糖包埋DNA酶切
至少需要5 unit限制酶才能在16小时内完全切割1 µg琼脂糖包埋的λ DNA。
备注
低盐、pH> 8.0、高浓度甘油(>5%)或过量酶切都会导致星活性。
商业化同裂酶
采用REsearch™软件寻找同功酶。
双酶切
采用DoubleDigest™软件确定双酶切的最佳条件。
兼容性末端
BclI, BglII, Bsp143I, MboI, PsuI。
甲基化影响
Dam: 完全重叠 – 不影响。
Dcm: 可能重叠 – 不影响。
CpG: 可能重叠 – 不影响。
EcoKI: 无重叠 – 不影响。
EcoBI: 无重叠 – 不影响。
Dcm: 可能重叠 – 不影响。
CpG: 可能重叠 – 不影响。
EcoKI: 无重叠 – 不影响。
EcoBI: 无重叠 – 不影响。
| Methylation type | Sequence | Cleavage effect |
|---|---|---|
| Dam (GATC) | GGm6ATC C |
不阻止酶切 |
| Dcm (CCWGG) | 5'...Cm5CW GG ATCm5CW GG ...3' |
不阻止酶切 |
| CpG | 5'...m5C G GATCm5C G ...3' |
不阻止酶切 |
| bp from the recognition site to fragment end | ||||
|---|---|---|---|---|
| 1 | 2 | 3 | 4 | 5 |
| 50-100 | ||||
| Lambda | ΦX174 | M13mp18/19 | pBR322 | puc18/19 | pUC57 |
|---|---|---|---|---|---|
| 5 | 0 | 1 | 1 | 1 | 1 |
| pTZ19R/U | pTZ57R | pBluescriptIIKS(-/+) | pBluescriptIISK(-/+) | pACYC177 | pACYC184 |
| 1 | 1 | 1 | 1 | 1 | 1 |
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