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- Thermo scientific -fermentas
- R1011
- 2025年10月15日
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| Catalog# | Size, concentration | Supplied with: | Certificate of Analysis | MSDS | |
| 4X DualColor™ Protein Loading Buffer | 20X Reducing Agent (2 M DTT) | ||||
| R1011 | for 1000 samples of 40 µl | 2 x 5.00 ml | 2 x 1.00 ml | R1011 | |
- Features
-
- 保护蛋白在SDS-PAGE电泳分离时不会被降解。
- 两种染料(蓝色和粉红色)非常方便，可用于：
一 示踪电泳进程。
一 监控Western杂交蛋白转移。
- Applications
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- SDS-聚丙烯酰胺凝胶(SDS-PAGE)电泳前蛋白样本处理。
- 监控Western杂交蛋白转移。
说明
DualColor™ Protein Loading Buffer Pack是一个完整的缓冲液系统，适合SDS-PAGE电泳前的蛋白样本处理。许多蛋白对pH值的变化(电泳时Tris缓冲液温度波动引起)非常敏感。该优化上样缓冲液可以保护蛋白样本在SDS-PAGE (1)上样前加热处理和电泳过程中不被降解。该上样缓冲液含有的两种示踪染料可监控电泳进程，分别是蓝色的溴酚蓝和粉红色的派洛宁Y，此外粉红色染料还可以监控Western杂交时的蛋白转膜过程。
DualColor™ Protein Loading Buffer Pack还含有SDS和DTT，可完全解离蛋白的所有高级结构。缓冲液的SDS可与蛋白疏水区结合，将蛋白展开并使之带上负电荷。DTT可打开二硫键并摧毁残留的二级结构。由于DTT在多次冻-融循环时容易氧化，其通常单独包装。缓冲液还含有甘油，确保上样后蛋白样本沉积在点样孔中。
质量控制
功能测试：SDS-PAGE和后续Western杂交前蛋白样本准备。
组分
- 4X Loading Buffer: 0.25 M Tris-HCl (pH 8.5, 25°C), 8% SDS, 1.6 mM EDTA, 0.024% Pyronin Y, 0.04%溴酚蓝, 40%甘油.
- 20X Reducing Agent: 2 M DTT.
备注
在15% PAA凝胶中，派洛宁Y染料的迁移速率比溴酚蓝慢。
保存
4X DualColor™ Protein Loading Buffer室温保存，-20°C可长期保存。
20X Reducing Agent需-20°C保存。
20X Reducing Agent需-20°C保存。
图1。DulaColor™ Protein Loading Buffer增加蛋白的稳定性。
12% Tris-glycine SDS-PAGE电泳分离后PageBlue™ Protein Staining Solution (#R0571)染色。
M – PageRuler™ Unstained Protein Ladder
1, 3 – DualColor™ Protein Loading buffer (pH 8.5)和DTT处理的蛋白样本
2, 4 – 常规Laemmli loading buffer (pH 6.8)和DTT处理的蛋白样本
12% Tris-glycine SDS-PAGE电泳分离后PageBlue™ Protein Staining Solution (#R0571)染色。
M – PageRuler™ Unstained Protein Ladder
1, 3 – DualColor™ Protein Loading buffer (pH 8.5)和DTT处理的蛋白样本
2, 4 – 常规Laemmli loading buffer (pH 6.8)和DTT处理的蛋白样本
图2。DualColor™ Protein Loading Buffer含有染料的可见性。
12% Tris-glycine SDS-PAGE.
1-2 – DualColor™ Protein Loading Buffer Pack处理的蛋白样本
3-4 – Protein Loading Buffer Pack (#R0891)处理的蛋白样本
12% Tris-glycine SDS-PAGE.
1-2 – DualColor™ Protein Loading Buffer Pack处理的蛋白样本
3-4 – Protein Loading Buffer Pack (#R0891)处理的蛋白样本
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