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- Thermo scientific -fermentas
- K1631
- 2025年10月15日
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| Catalog# | Size, concentration | Certificate of Analysis | MSDS |
| K1631 | for 20 react. | K1631 | |
| K1632 | for 100 react. | K1632 |
- Features
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- 全长的第一链cDNA 产量高，最长可合成13 kb的cDNA。
- 增加的反应温度范围：42-55°C。
- 配套提供RiboLock™ RNase Inhibitor。
- 完全 一 试剂盒提供oligo(dT)18 和随机六聚体引物。
- Applications
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- 第一链cDNA合成，作为RT-PCR和实时RT-PCR模板(1, 2)。
- 构建全长cDNA文库。
- 制备杂交用探针。
- aRNA合成。
试剂盒使用RevertAid™ H MinReverse Transcriptase。该酶由于点突变而完全消除了RNase H活性。
因此，该酶不能降解第一链cDNA合成时形成的RNA-DNA复合体中的RNA。该酶在宽温度范围(42-55°C)保持活性，适合逆转录具有大量二级结构的RNA。试剂盒配套提供的重组RiboLock™ RNase Inhibitor 有效保护RNA模板免于降解。该产品与逆转录反应完全兼容，因为在55°C时仍然保持活性。
试剂盒配套提供oligo(dT)18 和随机六聚体引物。oligo(dT)18 与mRNA 的poly(A)尾选 择性结合。随机六聚体引物转录无需poly(A) 尾，因此可转录mRNA的5’-端区域，也可以无poly(A)尾的RNA (micro RNAs)为模板合成cDNA。试剂盒也可使用基因特异性引物。
第一链cDNA可直接作为PCR (见RT-PCR操作说明书)、实时PCR或第二链cDNA合成(见操作说明书)的模板。
- RevertAid™ H Minus Reverse Transcriptase
- RiboLock™ RNase Inhibitor
- 5X Reaction Buffer
- dNTP Mix, 10 mM each
- Oligo(dT)18 Primer
- Random Hexamer Primer
- Control GAPDH RNA
- Forward GAPDH Primer, 10 µM (5'-CAAGGTCATCCATGACAACTTTG-3')
- Reverse GAPDH Primer, 10 µM (5'-GTCCACCACCCTGTTGCTGTAG-3')
- DEPC-treated Water
- 详细的操作手册
RevertAid™ H Minus First Strand cDNA Synthesis Kit 催化第一链cDNA 合成(模板：1 μg 小鼠心脏总RNA；引物：oligo(dT)18 )。合成的cDNA作为后续PCR扩增(Long PCR Enzyme Mix (#K0181))的模板。小 鼠dystrophin基因mRNA 5’-end 特异性引物和一系列侧翼引物配合扩增目标基因的不同区域。
M1 – GeneRuler™ DNA Ladder Mix
1-6 – RT-PCR 产物
M2 – Lambda – pUC Mix Marker
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文献和实验有SMART cDNA 合成和文库构建到? TriplEx2 或者Creator 供体载体 pDNR-LIB所需的试剂。因为该试剂盒是特别针对文库构建来设计的，所以它与Clontech™ PCR-Select™cDNA 差减杂交试剂盒不能配合使用。 SMART PCR cDNA Synthesis Kit 可以用来与Clontech™ PCR-Select™ cDNA 差减技术一起使用。总RNA 不能直接用来做差减实验，但可以通过SMART PCR cDNA Synthesis Kit 来扩增出
cDNA Synthesis from MOLT-4 Cells
second strand yield. 11. Add 0.5 ml PN buffer from Qiegen Nucleotide Removal Kit to the remaining reaction, and mix it ,load it into the spin column, and follow the pr℃edures comimg with the kit to purify the double strand DNA. 12. Elute the cDNA
Universal RiboClone® cDNA Synthesis System
Hexameric Primers or an Oligo(dT) Primer, followed directly by second strand replacement synthesis using RNase H and DNA Polymerase I. After treatment with T4 DNA Polymerase to flush the ends, the double-stranded cDNA molecules are prepared for cloning
技术资料暂无技术资料 索取技术资料
