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| Catalog# | Size, concentration | Certificate of Analysis | MSDS |
| K1611 | for 20 react. | K1611 | |
| K1612 | for 100 react. | K1612 |
- Features
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- 全长的第一链cDNA产量高,最长可合成9 kb的cDNA。
- 反应温度:37°C。
- 配套提供RiboLock™ RNase Inhibitor。
- 完全 一 试剂盒提供oligo(dT)18 和随机六聚体引物。
- Applications
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- 第一链cDNA合成,作为RT-PCR和实时RT-PCR模板(1, 2)。
- 构建全长cDNA文库。
- 制备杂交用探针。
- aRNA合成。
试剂盒配套提供的重组RiboLock™ RNase Inhibitor有效保护RNA模板免于降解。试剂盒配套提供oligo(dT)18 和随机六聚体 的引物。oligo(dT)18 与mRNA的poly(A)尾选择性结合。随机六聚体引物转录无需poly(A) 尾,因此可转录mRNA 的5’-端区域,也可以无poly(A) 尾的RNA (micro RNAs)为模板合成cDNA。试剂盒也可使用基 因特异性引物。
第一链cDNA可直接作为PCR (见RT-PCR操作说明书)、实时PCR或第二链cDNA合成(见操作说明书)的模板。
- M-MuLV Reverse Transcriptase
- RiboLock™ RNase Inhibitor
- 5X Reaction Buffer
- dNTP Mix, 10 mM each
- Oligo(dT)18 Primer
- Random Hexamer Primer
- Control GAPDH RNA
- Forward GAPDH Primer, 10 µM (5'-CAAGGTCATCCATGACAACTTTG-3')
- Reverse GAPDH Primer, 10 µM (5'-GTCCACCACCCTGTTGCTGTAG-3')
- DEPC-treated Water
- 详细的操作手册
First Strand cDNA Synthesis Kit 逆转录乙肝病毒感染病人的血液总RNA。逆转录引物是病毒RNA 3’-末端的特异性寡核苷酸。合成的9.4 kb cDNA作为后续PCR (Taq DNA Polymerase)的模板。末端212 bp序列的成功扩增表明逆转录全长9.4 kb病毒RNA获得成功。
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- 作者
- 内容
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文献和实验Protocol for First-strand cDNA Synthesis
℃for 10 minutes and then at 37℃for 60 minutes.Stop the reaction by heating at 70℃for 10 minutes. Chill on ice.NoteThe synthesized cDNA can be amplified by the PCR (see Protocols for PCR using Taq and Pfu DNA Polymerases) without intermediate phenol
of mRNA) or random hexamers; the kit used here contains both kinds); nucleotides for DNA synthesis (dNTPs); MgC2 and buffers required by the enzyme, which are all present in the 5x Reaction Mix. Materials * iScript cDNA Synthesis Kit (BIORAD
methylation analysis, PCR, and multiplex PCR. The purified total RNA is ready to use in any application, such as RT-PCR, real-time RT-PCR, differential display, cDNA synthesis, Northern, dot, and slot blot analyses, and microarray analysis. The kits form
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