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First Strand cDNA Synthesis Ki

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  • Thermo scientific -fermentas
  • K1611
  • 2025年10月13日
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    K1611 for 20 react. K1611
    K1612 for 100 react. K1612
    Features

    • 全长的第一链cDNA产量高,最长可合成9 kb的cDNA。
    • 反应温度:37°C。
    • 配套提供RiboLock™ RNase Inhibitor。
    • 完全 一 试剂盒提供oligo(dT)18 和随机六聚体引物。
    Applications

    • 第一链cDNA合成,作为RT-PCR和实时RT-PCR模板(1, 2)。
    • 构建全长cDNA文库。
    • 制备杂交用探针。
    • aRNA合成。
    说明
    First Strand cDNA Synthesis Kit 是一个完整的以RNA为模板高效合成第一链cDNA的反应体系。试剂盒使用的重组M-MuLV Reverse Transcriptase的RNase H 活性比AMV reverse transcriptase低,因此可合成长达 9 kb的cDNA。

    试剂盒配套提供的重组RiboLock™ RNase Inhibitor有效保护RNA模板免于降解。试剂盒配套提供oligo(dT)18 和随机六聚体 的引物。oligo(dT)18 与mRNA的poly(A)尾选择性结合。随机六聚体引物转录无需poly(A) 尾,因此可转录mRNA 的5’-端区域,也可以无poly(A) 尾的RNA (micro RNAs)为模板合成cDNA。试剂盒也可使用基 因特异性引物。

    第一链cDNA可直接作为PCR (见RT-PCR操作说明书)、实时PCR或第二链cDNA合成(见操作说明书)的模板。


    质量控制
    功能测试:以多聚腺苷酸RNA转录子为模板合成第一链cDNA(分别测试特异性引物、oligo(dT)18 和随机六聚体引物)。合成的cDNA作为后续PCR的模板。

    组分
    • M-MuLV Reverse Transcriptase
    • RiboLock™ RNase Inhibitor
    • 5X Reaction Buffer
    • dNTP Mix, 10 mM each
    • Oligo(dT)18 Primer
    • Random Hexamer Primer
    • Control GAPDH RNA
    • Forward GAPDH Primer, 10 µM (5'-CAAGGTCATCCATGACAACTTTG-3')
    • Reverse GAPDH Primer, 10 µM (5'-GTCCACCACCCTGTTGCTGTAG-3')
    • DEPC-treated Water
    • 详细的操作手册


    图1。First Strand cDNA Synthesis Kit合成全长cDNA。
    First Strand cDNA Synthesis Kit 逆转录乙肝病毒感染病人的血液总RNA。逆转录引物是病毒RNA 3’-末端的特异性寡核苷酸。合成的9.4 kb cDNA作为后续PCR (Taq DNA Polymerase)的模板。末端212 bp序列的成功扩增表明逆转录全长9.4 kb病毒RNA获得成功。

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    • 作者
    • 内容
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    相关实验
    • Protocol for First-strand cDNA Synthesis

      ℃for 10 minutes and then at 37℃for 60 minutes.Stop the reaction by heating at 70℃for 10 minutes. Chill on ice.NoteThe synthesized cDNA can be amplified by the PCR (see Protocols for PCR using Taq and Pfu DNA Polymerases) without intermediate phenol

    • cDNA Synthesis

      of mRNA) or random hexamers; the kit used here contains both kinds); nucleotides for DNA synthesis (dNTPs); MgC2 and buffers required by the enzyme, which are all present in the 5x Reaction Mix.   Materials * iScript cDNA Synthesis Kit (BIORAD

    • AllPrep DNA/RNA 96 Kit

      methylation analysis, PCR, and multiplex PCR. The purified total RNA is ready to use in any application, such as RT-PCR, real-time RT-PCR, differential display, cDNA synthesis, Northern, dot, and slot blot analyses, and microarray analysis. The kits form

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