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RevertAid™ Reverse Transcripta

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  • Thermo scientific -fermentas
  • EP0441
  • 2025年10月15日
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      大量

    • - 热失活70°C, 10 min
    • - 重组酶
    • - LO合格
    • - -20°C保存
    Catalog# Size, concentration Supplied with: Certificate of Analysis MSDS
    5X Reaction Buffer
    EP0441 10,000 u (200 u/µl)
    (for 50 reactions of 20 µl)
    1.00 ml EP0441
    EP0442 5 x 10,000 u (200 u/µl)
    (for 250 reactions of 20 µl)
    5 x 1.00 ml EP0442
    EP0447 2000 u (200 u/µl)
    (for 10 reactions of 20 µl)
    1.00 ml
    Features

    • 高效制备全长的第一链cDNA,最长可达13 kb。
    • 最佳活性温度为42°C。
    • 温度高达50°C时仍有活性。
    • 合成掺入修饰核苷酸,如Cy3-、Cy5-、罗丹明-、氨基-、荧光-标记的核苷酸。
    Applications

    • 第一链cDNA合成,用于RT-PCR和实时RT-PCR。
    • 合成cDNA,用于克隆和表达研究。
    • 制备芯片研究用标记的cDNA探针。
    • DNA标记(3)。
    • 引物延伸法分析RNA (3)。
    说明
    RevertAid™ Reverse Transcriptase (RT)是遗传修饰的M-MuLV RT,其与M-MuLV RT的结构和催化特性。该酶具有RNA和DNA依赖的聚合酶活性和RNase H 活性(1, 2)。该酶的RNase H活性比禽类成髓细 胞瘤逆转录酶(AMV)低很多(1, 2)。

    来源
    含有克隆基因pol 的大肠杆菌细胞。该基因编码小鼠白血病病毒逆转录酶。

    分子量
    76.1 kDa,单体。

    活性单位定义
    1 个活性单位是指在37°C、10分钟内将1 nmol dTMP合成掺入多聚的核苷酸片段(吸附在DE-81上)所需的酶量。

    酶活性分析混合物:50 mM Tris-HCl (pH 8.3), 4 mM MgCl2 , 10 mM�TT, 50 mM KCl, 0.5 mM dTTP, 0.4 MBq/ml [3 H]-dTTP, 0.4 mM�olyA・oligo(dT)12-18


    保存缓冲液
    保存缓冲液组分:
    50 mM Tris-HCl (pH 7.5), 0.1 M NaCl, 1 mM�DTA, 5 mM DTT, 0.1% (v/v) Triton X-100和50% (v/v)甘油。

    5X 反应缓冲液
    250 mM Tris-HCl (pH 8.3, 25°C), 250 mM KCl, 20 mM MgCl2 , 50 mM DTT。

    质量控制
    相关测试表明无内切和外切脱氧核糖核酸酶、核糖核酸酶、磷酸酶污染。 功能测试:第一链cDNA合成和RT-PCR。

    抑制与失活
    • 抑制剂:金属螯合剂、无机磷酸盐、焦磷酸和多胺(2)。
    • 失活:70°C加热10分钟。


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