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- Thermo scientific -fermentas
- EF0511
- 2025年10月12日
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| Catalog# | Size, concentration | Supplied with: | Certificate of Analysis | MSDS |
| 10X Reaction Buffer | ||||
| EF0511 | 500 u (1 u/µl) | 3 x 1.00 ml | EF0511 |
- Features
-
- 在Fermentas公司的限制酶、PCR和RT缓冲液中均有活性。
- 65°C加热15分钟使酶完全失活。
- Applications
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- 末端的去磷酸化处理，见操作方法
一 DNA和RNA (1)
一 克隆载体去磷酸化，防止载体自连
一 T4 polynucleotide kinase标记前，DNA和RNA 5’-末端去磷酸化处理。 - PCR产物测序前，降解PCR混合物中的dNTP (2)。
- 蛋白的去磷酸化处理(3)。
- 末端的去磷酸化处理，见操作方法
说明
Shrimp Alkaline Phosphatase (虾碱性磷酸酶，SAP)催化DNA、RNA和核苷酸5’-和3’-磷酸基团的解离。该酶还可从蛋白中解离磷酸基团。
来源
北极虾Pandalus borealis 。
分子量
该酶是一个二聚体，由两个54 �kDa的亚基组成(4)。
活性单位定义
1个活性单位是指37°C、1分钟内水解1 μmol 4 -硝基苯磷酸盐所需的酶量。
酶活性分析混合物：1 M 二乙醇胺-HCl (pH 9.8), 0.5 mM MgCl2 , 10 mM 4-硝基苯磷酸盐。
保存缓冲液
保存缓冲液组分：
25 mM Tris-HCl (pH 7.6, 4°C), 1 mM MgCl2 , 0.1 mM ZnCl2 和50% (v/v)甘油。
25 mM Tris-HCl (pH 7.6, 4°C), 1 mM MgCl2 , 0.1 mM ZnCl2 和50% (v/v)甘油。
10X 反应缓冲液
0.1 M Tris-HCl (pH 7.5, 37°C), 0.1 M MgCl2 和 1 mg/ml BSA。
质量控制
相关测试表明无内切或外切脱氧核糖核酸酶、核糖核酸酶污染。功能测试为DNA 5’ -端的去磷酸化处理。
抑制与失活
- 抑制剂：金属螯合剂、无机磷酸盐或磷酸盐类似物。
- 失活：65°C加热15分钟。
备注
虾碱性磷酸酶(SAP)与DNA结合会改变条带的琼脂糖凝胶电泳迁移率。为避免此种现象，电泳前先处理样本或分子量标准。处理方法如下：样本或分子量标准与Fermentas公司6X DNA Loading Dye & SDS溶液(#R1151)混合；65°C加热10分钟后冰浴保存。
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