TranscriptAid™ T7 High Yield Transcription Kit

TranscriptAid™ T7 High Yield T

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  • 2025年10月17日
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    • 品牌

      Thermo scientific -fermentas

    • 货号

      K0441

    • 库存

      大量

    • - -20°C保存
    Catalog# Size, concentration Certificate of Analysis MSDS
    K0441 for 50 react. (of 20 µl) K0441
    Features

    • 产量高 一 2小时制备高达200 μg RNA。
    • 可转录长片段或短片段RNA。
    • 反应放大(单次)可获得毫克级RNA。
    • 灵活 一 可制备标记的、非标记的或加帽的RNA。
    • 试剂盒内含有RiboRuler™ 一 RNA Ladder,适合定量和产物大小鉴定。
    Applications

    • 体外转录。
    • 体外翻译。
    • 制备杂交探针,用于:
      一 基因芯片。
      一 原位杂交。
      一 印迹实验。
    • RNase酶切保护分析。
    • RNA结合蛋白分析。
    • 反义RNA和RNA干扰。
    • RNA扩增。
    • 微注射研究。
    说明
    TranscriptAid™ T7 High Yield Transcription Kit试剂盒可以从含有T7 RNA聚合酶启动子的DNA模板(线性质粒或PCR产物)中高效体外转录制备RNA。试剂盒包含可配置50次20 μl反应体系的试剂,每个反应可在2小时内从1/μg的模板中转录制备高达200 μg RNA(见图2)。反应体系可放大制备毫克级的全长RNA。

    该试剂盒可用于制备大量长片段或短片段RNA。试剂盒内含有转录所需的全部试剂,也提供RiboRuler™ High Range RNA Ladder以鉴定产物大小和产量。


    质量控制
    20 μl反应体系中、2小时内可从1 μg对照模板DNA中制备140-170 完整的2.2 kb RNA转录物。

    组分
    • TranscriptAid™ Enzyme Mix
    • 5X TranscriptAid™ Reaction Buffer
    • DNase I, RNase-free
    • ATP Solution
    • CTP Solution
    • GTP Solution
    • UTP Solution
    • Control template
    • 3 M Sodium Acetate Solution, pH 5.2
    • DEPC-treated Water
    • 2X RNA Loading Dye
    • RiboRuler™ High Range RNA Ladder, ready-to-use
    • 0.5 M EDTA, pH 8.0
    • 详细的操作手册


    图1。高产量全长RNA转录子。
    1 μg DNA模板体外转录高效制备500、1000和6000碱基的RNA转录子(20 μl反应体系,37°C孵育2小时)。转录产物稀释80倍后取6 μl进行1%琼脂糖/TAE凝胶电泳,凝胶中添加0.5 μg/ml溴化乙啶。
    M – RiboRuler™ High Range RNA Ladder, ready-to-use
    1, 4, 7 – 500 b RNA转录子
    2, 5, 8 – 1000 b RNA转录子
    3, 6, 9 – 6000 b RNA转录子
    图2。RNA合成的时间累积曲线。
    TranscriptAid™ T7 High Yield Transcription Kit转录制备500、1000和6000碱基RNA (20 μl反应体系,1 μg DNA模板)。上图为反应0-4小时内转录产物产量(μg)变化。使用Agilent 2100 Bioanalyzer检测不同时间点的RNA产量。
    图3。短RNA合成的时间累积曲线。
    TranscriptAid™ T7 High Yield Transcription Kit转录制备50和100碱基RNA。上图为反应0-8小时内转录产物产量(μg)变化。使用Agilent 2100 Bioanalyzer检测不同时间点的RNA产量。

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