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X-Gal

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  • Thermo scientific -fermentas
  • R0941
  • 2025年10月12日
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    X-Gal

    Catalog# Size, concentration Certificate of Analysis MSDS
    R0401 0.5 g R0401
    R0402 2 g R0402
    R0404 1 g R0404

    X-Gal Solution, ready-to-use

    Catalog# Size, concentration Certificate of Analysis MSDS
    R0941 10 ml (20 mg/ml) R0941

    X-Gal
    分子式 : C14 H15 BrClNO6
    分子量 : 408.6

    Applications

    • 蓝/白克隆筛选:从蓝色未重组克隆中找出重组的白色克隆(1)。
    • 肉眼检测β-半乳糖苷酶报告基因转染真核细胞后的表达。
    • 免疫学和组织化学方法检测β-半乳糖苷酶的活性。
    说明
    X-Gal (5-bromo-4-chloro-3-indolyl-beta-D-galacto-pyranoside,5-溴-4-氯-3-吲哚-beta-D-半乳糖苷)是beta-半乳糖苷酶的惰性发色底物。beta-半乳糖苷酶降解X-Gal产生无色的半乳糖和4-chloro-3-brom-indigo,形成深蓝色沉淀。IPTG诱导lacZ 基因表达,表达产物beta-半乳糖苷酶降解X-Gal并形成蓝色克隆(见下图)。

    即用型X-Gal溶液不稳定,经0.22 μm膜过滤除菌。其与IPTG(#R1171)配套用于蓝/白克隆筛选实验。


    质量控制
    经HPLC检测,纯度超过98%。功能检测方法:蓝/白克隆筛选。

    备注
    • 推荐用二甲基甲酰胺或二甲基亚砜配制20 mg/ml的X-Gal储备液。二甲基甲酰胺会溶解某些塑料材料,因此需避免直接将含有二甲基甲酰胺的溶液加入到塑料培养皿中。
    • 二甲基甲酰胺有毒,在琼脂糖平板上铺细菌时,必须等含有二甲基甲酰胺的X-Gal溶液完全风干后才能进行。

    保存
    X-Gal Solution, ready-to-use (#R0941)室温或4°C时,棕色管中可稳定保存至少12个月。
    X-Gal (#R0401, #R0402, #R0404) -20°C黑暗保存。


    图。 IPTG诱导lacZ 基因表达,表达产物beta-半乳糖苷酶降解X-Gal并形成蓝色克隆。

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    • 作者
    • 内容
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    图标文献和实验
    相关实验
    • About LacZ,IPTG and X-Gal

      , transfect the DNA into mammalian cells, and then fix and stain a tissue with X-gal. The cells that turn blue must have the beta galactosidase enzyme, the product of the lac Z gene, which could only have been expressed from the donated promoter. Ergo

    • X-gal Staining Procedure

        Materials Fixative 2% Paraformaldehyde (in PBS) Staining solution 5 mM potassium ferricyanide, 5 mM potassium ferrocyanide, 2 mM MgCI, 0.01% sodium deoxycholate 0.02% Nonidet P-40 (NP-40) in PBS. X-gal Stock 40 mg

    • Detection of -Galactosidase Activity: X-gal Staining

      X-gal staining is a rapid and convenient histochemical technique used to detect reporter gene expression. A prerequisite is the creation or acquisition of transgenic reporter mouse lines, in which the bacterial LacZ gene has been knocked

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