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- Thermo scientific -fermentas
- K0621
- 2025年10月15日
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| Catalog# | Size, concentration | Certificate of Analysis | MSDS |
| K0621 | for 10 react. | K0621 | |
| K0622 | for 30 react. | K0622 |
- Features
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- 高特异放射活性探针，放射比活性大于1x109 dpm/μg DNA。
- 快速 一 37°C反应5分钟。
- Klenow Fragment, exo-标记产量高，无外切酶活性，标记时不降解DNA。
- 灵活 一 放射标记dATP或dCTP均可。
- Applications
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- 制备放射性标记DNA探针，用于多种杂交实验，如Southern和Northern杂交、菌落/噬菌斑杂交、点/狭缝杂交和原位杂交等。
说明
DecaLabel™ DNA Labeling Kit是一种先进的快速合成高特异活性放射性DNA探针的系统。标记原理为改进的随机引物方法(由Feinberg和Vogelstein开发(1, 2))。
与传统随机引物标记方法相比，该方法的主要改进之处是使用随机十聚体引物代替了原来的六聚体引物，确保引物在37°C更有效的与DNA退火。试剂盒使用的Klenow Fragment, exo–经遗传工程改造，无外切酶活性。该酶在标记时不会降解探针，即使是少量模板也能获得大量标记探针。因此，任何长度的DNA模板都可均一地标记。试剂盒提供两种标记混合物(标记的dATP和dCTP)，标记方法选择更为灵活。
原理
随机十聚体引物与变性DNA分子退火，Klenow Fragment, exo-将标记的dNTP掺入到新合成DNA链中(见图1)。
质量控制
功能测试：对照DNA标记实验。合成探针的特异性放射比活性通常>1x109 dpm/μg DNA。
组分
- Klenow Fragment, exo-
- Decanucleotides in Reaction Buffer
- Mix A (-dATP)
- Mix C (-dCTP)
- dNTP Mix
- Control Template
- Water, nuclease-free
- 详细的操作手册
图1。反应时间和模板量对DNA探针的特异放射活性的影响。
按试剂盒操作方法，50 µCi [alpha-33 P]-dCTP (2500 Ci/mmol)标记不同量λ DNA/HindIII片段。
按试剂盒操作方法，50 µCi [alpha-33 P]-dCTP (2500 Ci/mmol)标记不同量λ DNA/HindIII片段。
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DecaLabel™ DNA Labeling Kit
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