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- 2026年02月27日
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客户需要注意的是Co-IP方法可能检测不到低亲和力和瞬间的蛋白质－蛋白质相互作用；同时如果检测到有相互作用并不能完整表明生理状态下共定位，此外检测到的两种蛋白质的结合可能不是直接结合，而可能有第三者在中间起桥梁作用；最后必须在实验前预测目的蛋白是什么，以选择最后检测的抗体，所以，若预测不正确，实验就得不到结果，方法本身具有一定风险,另外客户可以选择Co-IP得到的样品利用质谱进行后续分析.
服务流程图
实验结果
使用protein X的抗体进行免疫沉淀(IP), 以IgG为阴性对照。可以看到, 沉淀后的产物中用protein X的抗体可以检测到条带，而IgG组不能沉淀到protein X。IP过程对protein X起到了纯化和富集的作用。而使用protein Y的抗体检测沉淀产物也可以检测到条带，结果证明，protein Y和protein X具有相互作用(co-IP)。
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文献和实验—— co-IP 检测 Hsp90 与 Cdc37 结合情况1、实验材料SKBR3 细胞，PMSF（Amresco，cat:329-98-6），cocktail（上海晶莱生物），脱脂奶粉（cat:66196131T），β-actin（上海晶莱生物）。Anti-Hsp90(santa,cat:sc-69703)、Anti-Cdc37(santa,cat:sc-13129)、Protein A+G agrose(Beyotime)，细胞刮，4 度离心机（eppendorf，centrifuge
了一线技术支持常被问到的问题，希望这篇纯干货能帮助大家顺利升级打怪，早日驾驭 IP、co-IP。 IP、co-IP、pull-down 简介 IP（Immunoprecipitation），免疫沉淀：是利用固定在磁珠或琼脂糖树脂等基质上的特异性抗体对抗原进行小型亲和纯化的一种方法 Co-IP（co-Immunoprecipitation），免疫共沉淀： co-IP 是一种常用的鉴定蛋白-蛋白相互作用的方法，其基本实验流程和IP类似，通过使用诱饵蛋白（IP 中的抗原，bait protein）特异
紫叶竹韵 做IP，之后Western 分析，看到有两条带，在25和50KD左右，应该是抗体的两条带，但是我的目的蛋白也是52KD的，这该怎么区分呢。 woxingwosu 最好是选择与做IP不同来源的抗体来做（比如说IP用鼠的抗体，WB就用兔的抗体），这样就不会检测到抗体的两条带。 如果没有不同来源的抗体的话，就要做IP的时候尽量少放点抗体，跑胶跑得远一点，使得目的蛋白能够被看到，不过由于你的蛋白是在是太接近重链
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