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15片/盒,10盒/箱
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KIRGEN秉承“致力于改善人类健康并持续为客户创造更多价值”的企业宗旨,专注于改进实验室条件,提高实验和检测的质量与速度,推进高质量科学研究和临床检验。产品被广泛应用于生命科学研究机构、医疗机构、临床实验室、工业单位等。
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文献和实验为recA+,质粒DNA易发生突变,DH5α或JM109,XL1-blue菌株为重组缺陷性菌株,可稳定扩增已鉴定的重组质粒),扩增细菌并纯化质粒。 三、重组病毒质粒转导293细胞 1、293细胞培养:转导24小时前,以方瓶为例,接种2×106 293细胞于25cm2方瓶,使生长密度约50-70%.(也可以使用6孔或96孔板) 2、以PacI单酶切重组病毒质粒(转导25cm2方瓶约需4ugDNA),完全线性化后,乙醇沉淀,再以20 ul ddH2O溶解。 3、脂质体包裹质粒
为重组缺陷性菌株,可稳定扩增已鉴定的重组质粒),扩增细菌并纯化质粒。 三 重组病毒质粒转导 293 细胞 1 293细胞培养:转导24小时前,以方瓶为例,接种2×106 293细胞于25cm2 方瓶,使生长密度约50-70%。(也可以使用6孔或96孔板) 2 以PacI单酶切重组病毒质粒(转导25cm2 方瓶约需4µgDNA),完全线性化后,乙醇沉淀,再以20 µl ddH2 O溶解。 3 脂质体包裹质粒(以Lipofectamine为例):每4µ
免疫及单个细胞制备所需的其他试剂和器材。 操作步骤: 1. Th克隆的诱导:以可溶性蛋白抗原加CFA作基础免疫动物,7 d后取其淋巴结制备单个细胞悬液。将2×106 淋巴结细胞加入24孔培养板孔中,同时加入蛋白抗原和6×106 经2000rad照射的同系脾细胞,总体积为2ml。置37℃,5%CO2 温箱培养6~8d。 2. Th1克隆的诱导:在96孔板各孔加入50μl Th细胞悬液(≤2000/ml),50μl经过照射的同系脾细胞(2×107 /ml),50μl抗原(200~
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