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上海善然生物科技有限公司
SYBR Premix Ex Taq II (Tli RNaseH Plus) (2×Conc.)*1 1.0 ml × 5
ROX Reference Dye (50×Conc.)*2 200 μl × 1
ROX Reference Dye II (50×Conc.)*2 200 μl × 1
*1 内含TaKaRa Ex Taq HS,dNTP Mixture,Mg2+,Tli RNaseH,SYBR Green I。
*2 ROX Reference Dye是用以校正孔与孔之间产生的荧光信号误差。例如使用Life Technologies的Real Time PCR扩增仪进行实验就需要校正。
◆ 需要使用ROX Reference Dye校正的仪器
Applied Biosystems 7300 Real-Time PCR System
Applied Biosystems StepOnePlus Real-Time PCR System (Life Technologies)
◆ 需要使用ROX Reference Dye II校正的仪器
Applied Biosystems 7500和7500 Fast Real-Time PCR System(Life Technologies)
◆ 不需要校正的仪器
Thermal Cycler Dice™ Real Time System II (Code No.TP900/TP960)
LightCycler/LightCycler 480 System (Roche Diagnostics)
CFX96 Real-Time PCR Detection System (Bio-Rad)
Limited Use Label License:[M40], [M82], [L11], [L46], [P5]
■ 制品说明
本制品是采用SYBR Green I*嵌合荧光法进行Real Time PCR的专用试剂。制品中含有Real Time PCR反应的最适浓度SYBR Green I,是一种2×浓度的Premix Type试剂,进行实验时,PCR反应液的配制十分方便简单。
本制品中还添加了Tli RNaseH(耐热性RNaseH),以cDNA作为模板进行PCR反应时,可以最大限度抑制由于cDNA中残存mRNA对PCR反应造成的阻害作用。
本制品Buffer经过改良,使反应特异性比SYBR Premix Ex Taq(Tli RNaseH Plus)(Code No.RR420A)更高。能抑制非特异性反应,可以在宽广的范围内进行更加准确的定量。本Buffer和Hot Start法用DNA聚合酶TaKaRa Ex Taq HS组合使用,可以进行重复性好、可信度高的Real Time PCR解析。
*:Takara Bio使用SYBR Green I作为研究试剂已得到Molecular Probes Inc.的许可。
■ 保存
4℃。
注意: 1. 4℃可保存6个月。
2. 避光保存,避免污染。
3. 干冰运输,到货后4℃避光保存。
4. 长期保存请置于-80℃,勿存于-20℃。产品融解后请于4℃保存,并在6个月内用完。
■ 注意事项
1. 使用时请上下颠倒轻轻均匀混合,避免产生气泡,防止因混合不均匀造成的反应不足。
(1) 请勿涡旋振荡混匀。
(2) SYBR Premix Ex Taq II (Tli RNaseH Plus) (2× conc.)在-80℃存放可能会产生白色或淡黄色的沉淀,可用手握缓慢溶解,于室温短时间避光放置,轻柔上下颠倒混匀直至沉淀全部消失。
(3) 沉淀会导致溶液成分不均匀,使用前务必充分混匀试剂。
2. 配制PCR反应液时, 试剂请于冰上放置。
3. 本制品中含有荧光染料SYBR Green I,配制PCR反应液时应避免强光照射。
4. 反应液的配制、分装请一定使用新的 (无污染的) 枪头、Microtube等,尽量避免污染。
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文献和实验为了证明Bioteke公司SYBR GREEN I实时荧光定量产品的质量,我们用国际知名品牌TaKaRa的SYBR® Premix Ex Taq™ (Perfect Real Time)实时荧光定量进行对比,在相同的模板、引物和反应体系下,用Bio-Rad荧光定量PCR仪进行了对比实验。 实验材料 小鼠肝脏组织 山东大学实验室提供样品cDNA 实验方法 RNA提取:Bioteke RNApure高纯总
Cloning of Taq polymerase-amplified PCR products
实验原理 The plasmid vector (pCR®II-TOPO® or pCR®2.1-TOPO®) is supplied linearized with: Single 3´-thymidine (T) overhangs for TA Cloning® Topoisomerase I covalently bound to the vector (referred to as "activated
Sequencing Using the Du Pont Genesis™ 2000 DNA Analysis System
The Du Pont Genesis™ 2000 DNA Analysis System consists of an instrument, reagents capable of labeling DNA with novel fluorescent dideoxynucleotides (1 ), and a Macintosh® II computer to operate the instrument and perform all subsequent data
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