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文献和实验Isolation of RNA from Difficult Tissues
the pellet in nuclease-free water, and extract with phenol:chloroform:IAA until this quick-forming white precipitate no longer occurs. High yields of intact RNA can be achieved once abundant DNA and nucleases are brought under control. RNAlater ™: Making
;这样得到的白细胞沉淀中带有较多的血浆蛋白,影响RNA的抽提,因此我们建议用以上方法,先把血浆弃去后再加淋巴分离液。 B. 在一些方法中,分离得到的白细胞先用RNAlater保存进行运输;由于分离的白细胞往往污染有红细胞,红细胞会影响 RNAlater的保存效果;另外,保存在RNAlater中的白细胞在重新回收提取RNA时还有部分损失。 因此若实验室有Trizol试剂,我们建议直接用Trizol试剂把白细胞溶解,在Trizol试剂中的RNA是相对稳定的,-20℃可以保存一个星期,-70℃可以保存一个
/定量研究基因表达分析的重要前提。为了达到这个目的,往往需要将液氮或者干冰带到采样现场,采样后立即抽提RNA或者运回实验室保存。对于实验者来说非常不方便。著名的QIAGEN公司最近新推出一种RNA抽提试剂:RNeasy Protect Kit,提供一整套RNA保护和分离试剂,从样品的制备到RNA的抽提,只需一个试剂盒即可解决所有问题。保证样品的表达信息不受破坏,确保得到可信的基因表达分析结果。试剂盒里提供一种RNAlater RNA Stabilization Reagent,只要在采样后立即将新鲜
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