- ￥2800
- 晶诚
- 武汉
- C530001
- 2026年08月25日
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- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
4℃，20%乙醇保存
- 保质期：
2年
- 英文名：
GST Crystarose FF
- 库存：
大量
- 供应商：
武汉晶诚生物科技有限公司
- 规格：
25ml
Glutathione Crystarose 4FF
一、简介 Glutathione 琼脂糖凝胶是专门设计用于纯化谷胱甘肽 S-转移酶 （GST）融合蛋白、其它的谷胱甘肽转移酶以及与谷胱甘肽有亲和作用的蛋白的 亲和色谱填料，一步分离就可得到很纯的目标蛋白，纯化条件温和，可以保证蛋 白的活性。 本产品是本公司自主设计合成的 GST 琼脂糖凝胶，很好的物理和化学稳定 性，使用寿命长，使用方便。良好的批次重复性，易于放大，所以无论是研发还 是生产都是理想的选择。
二、亲和填料特性： 特点 基团密度高，载量大 基质 4%的交联琼脂糖凝胶 吸附载量 >10mgGST 融合蛋白/ml 亲和填料颗粒大小 45-165μm 最大流速 700cm/h PH 范围 3-12，在位清洗时 pH 范围可到 3-12 使用温度 常温 保存温度 +4~8℃ 保存液体 20%乙醇 化学稳定性 70%乙醇，6 M 盐酸胍，0.1M NaOH 室温 1h； 适用所有常用缓冲溶液
三、适用范围 分离谷胱甘肽 S-转移酶（GST）融合蛋白、其它的谷胱甘肽转移酶以及与 谷胱甘肽有亲和作用的蛋白。 四、应用实例 实验名称：Glutathione Crystarose 4FF 分离 GST 融合蛋白 实验步骤： 1、 GST 琼脂糖凝胶 FF 装柱，1.6×3cm，柱床体积为 6ml； 2、 用缓冲液 1 平衡 5 个床体积，流速为 5ml/min； 3、 调节样品 PH 值和缓冲液 1PH 值相同，尽量保持样品缓冲液和缓冲液 1 一 致，0.45um 滤膜过滤，上样。流速为 1--3ml/min； 4、 用缓冲液 1 再冲洗 10 个柱床体积，流速为 3ml/min； 5、 用缓冲液 2 洗脱，流速为 3-5ml/min，收集洗脱峰 6、 用纯水洗 5 个柱床体积，再用 20%的乙醇洗 5 个柱床体积，流速为 3-5ml/min，柱子置于+4~8℃环境中保存。 缓冲液组成： 缓冲液 1：1X PBS 缓冲液，Ph7.4(140Mm NaCL,2.7mM ，10mM 磷酸氢二钠，1.8mM 磷酸二氢钾) 。 缓冲液 2：25 mM Tris-HCl 缓冲液，pH8.0， 10mM 还原型谷胱甘肽，pH 到 8.0。
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文献和实验蛋白等） 可以完成一般方法很难完成的分离，如变性和非变性蛋白、功能不同的蛋白的分离 属于一种吸附层析，载量高，具有高效的捕获和浓缩作用。 基本步骤 亲和层析作为一种吸附性层析，主要步骤包括平衡、上样、清洗、洗脱和再平衡步骤 （图10)。由于亲和作用需要在特定的条件下结合和洗脱，亲和层析需要使用特定的结合缓冲液和洗脱缓冲液。 图10 亲和层析的基本步骤 适用性 带有标签的融合蛋白纯化，如His标签蛋白、GST标签蛋白等。 抗体及抗体片段的纯化 其他和某些配基有特异性结合作用的分子的纯化
鼠脑RNA提取、RT－PCR及GST融合蛋白纯化 一．鼠脑RNA提取 （1）RNA提取常用3种方法：A.异硫氰酸胍、氯化铯密度梯度分离植物RNA B.SDS－酚－氯仿法 C.硫氰酸胍－酚－氯仿法在制备用于反转录PCR的RNA时最实用 （2）总RNA的提取方法是基于RNA与其他胞内大分子在溶解性和沉降性
亲和的方法把它们和杂蛋白分离。 7. 纯化重组蛋白 重组蛋白构建已经考虑到纯化的问题，大大简化了纯化的步骤，但还是会遇到些实际的问题，所以需要详细阅读使用说明和注意事项。 (一) HIS标签重组蛋白可以很方便用镍琼脂糖凝胶FF分离，色谱填料已经螯合好了镍离子，使用非常方便，吸附载量更高，特异性更强，可以选择多种洗脱方式，是纯化这类融合蛋白的最佳工具。 (二) ST融合蛋白在表达时同时表达了谷胱甘肽s转酶，很方便用GST琼脂糖凝胶FF分离，然后再用肠激酶或凝血酶等酶解就得到表达的产物
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