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- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
4-30、20%乙醇保存
- 保质期:
2年
- 英文名:
NI Crystarose FF
- 库存:
大量
- 供应商:
武汉晶诚生物科技有限公司
- 规格:
25ml
产品概述
Ni-Crystarose FF是金属螯合亲和层析树脂,又称固定金属离子亲和色谱,其原理是利用蛋白质表面的某些氨基酸(主要是组氨酸),能与多种过度金属离子(如Ni2+)发生特殊的相互作用,利用这个原理可以把富含这类氨基酸的蛋白质吸附,从而达到分离的目的。
Ni-Crystarose Fast Flow是在高度交联琼脂糖上偶联金属螯合基团,此基团是有NTA和TED改变而来,兼具IDA的高载量、NTA的低镍离子泄露、TED的高纯度(纯度可能更高)、耐碱和还原剂的特性(详情见特性表),并预先鳌合Ni2+,无需脱镍,性能更稳定,方便耐用。
产品特点
a 刚性强、流速快、载量高。
b 镍离子脱落极低,通常在正常使用寿命内几乎不需要再鳌合镍离子。
c 亲和特异性更强,兼容复杂样品(如比较糟糕的细胞培养液)
d 非特异性吸附更低、几乎无需洗杂步骤,使用寿命更长。
e 特异性更强,纯度更高,载量更高,但洗脱 咪唑浓度可以更低。
f 试剂兼容性广,可兼容还原剂和EDTA。
g减少步骤,减少污染,生产放大更容易。
h该填料可以从含有高达5mM EDTA2Na中抓取含有His-tag蛋白,再加上极高的特异性,即使在非常糟糕的细胞培养液中纯化目的蛋白也可以达到无可比拟的纯化效果,解决了其他镍亲和填料(金属螯合层析填料)需要脱镍在清洗的弊端,而且使用寿命更长,载量更高。
适用范围
Ni Crystarose系列填料是推出的新一代His标签纯化产品,革新了传统的His标签纯化方法。其特点是非特异性更低,纯化蛋白纯度更高,纯化周期更短,可以在线彻底清洗防止污染,可以在含有EDTA和还原剂的溶液中捕获目标蛋白,特别适合真核分泌的His标签蛋白的纯化。
介质技术指标
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技术指标 |
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基质 |
高度交联6%琼脂糖 |
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平均颗粒大小 |
90µm |
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颗粒粒径范围 |
45µm-165µm |
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配基浓度 |
15µmol Ni2+/ml胶 |
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动态载量 |
40mg/ml His蛋白 |
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缓冲溶液 |
所有常规缓冲溶液 |
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化学稳定性 |
所有常用缓冲试剂;0.5M NaOH;0.01M HCl 40℃一周;1M NaOH、70%乙酸放置12h;2%SDS;30%异丙醇1h |
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pH稳定性(较长期) |
3-12 |
|
CIP稳定性(短时间) |
2-14 |
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最大压力 |
0.4Mpa |
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最大流速/推荐流速 |
750cm/h/150cm/h |
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储存液 |
20%乙醇 |
|
存储温度 |
0-30℃ |
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文献和实验一、实验原理 琼脂糖凝胶电泳是分离和纯化DNA片段的常用技术。把DNA样品加入到一块包含电解质的多孔支持介质(琼脂糖凝胶)的样品孔中,并置于静电场上。由于DNA分子的双螺旋骨架两侧带有含负电荷的磷酸根残基,因此在电场中向正极移动。在一定的电场强度下,DNA分子的迁移速度取决于分子筛效应。具有不同的相对分子质量的DNA片段泳动速度不一样,因而可依据DNA分子的大小来使其分离。 凝胶电泳不仅可分离不同分子质量的DNA,也可以分离相对分子质量相同,而构型不同的DNA分子。在电泳
【实验目的】 了解和掌握双向电泳技术,并学习用它来研究与DNA 复制相关的问题。 【实验原理】 DNA 分子有线状的,还有一些非线状的,如复制叉和重组DNA 结构。双向琼脂糖凝胶电泳技术就是被人们开发用以研究一些非线状DNA 分子的。双向琼脂糖凝胶电泳技术(2-D gel)实际上可分为两类:中性/中性双向凝胶电泳和中性/碱性双向凝胶电泳技术。它们的工作原理如下: 中性/中性
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