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文献和实验近日,蒙牛纯牛奶被检测出强致癌物——黄曲霉毒素M1,消息一出顿时又掀起一股食品安全隐患的讨论。相比之前的三聚氰胺,黄曲霉素是否更难检测? 现整理出全套的专业检测方案,让乳和乳制品中黄曲霉毒素M1无处躲藏。 1. 试用范围 牛奶,奶粉,发酵乳,干酪,奶油等乳制品 2. 方法原理 黄曲霉毒素M1易溶于极性溶剂,因此均匀基质中的黄曲霉毒素M1可以通过甲醇/水震荡分散提取,对于高脂肪/油含量的样品基质加入正己烷予以脱脂。本方法采用免疫亲和柱净化,荧光检测器测定乳制品中黄
免疫亲和层析技术使用单克隆抗体或经过亲和层析纯化的多克隆抗体。在某些情况下,可用未纯化的多克隆抗体,但一般不使用混合的单克隆抗体。 1. 应用多克隆抗体进行免疫亲和层析 使用多克隆抗体进行免疫亲和层析有一定的局限性,因为多克隆抗体通常结合抗原分子上的多个表位,虽然亲合力高,但洗脱困难。当一种抗原与多种不同的抗体结合后,需要很苛刻的洗脱条件,通常会损坏抗体层析柱,至少也会使部分抗原变性。在这种情况下,每种抗原和抗体相互作用的洗脱条件不同,故难以建立有效的洗脱条件。应用多克
蛋白A或蛋白G微珠-抗体层析柱是免疫亲和层析技术中最常用的微珠基质之一。此类层析柱容易制备,由于抗体分子是通过Fc段与微珠基质结合,抗原结合片段(Fab)可与抗原最大限度地发生作用。以下介绍的方法可用于蛋白质抗原的纯化,但类似的方案也适用于任何其他抗原。 抗体可直接与蛋白A或蛋白G结合。根据抗体与蛋白A或蛋白G的亲和力,可以选用蛋白A或蛋白G微珠。一般推荐将蛋白A用于与小鼠单抗IgG2a,IgG2b和IgG3亚类抗体交联,而将蛋白G用于IgGl类抗体。蛋白G用于与大鼠单抗的交联
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